[发明专利]一种Rh血型检测卡

摘要

本发明提供一种Rh血型检测卡，包括含有六个微柱的检测卡，所述六个微柱内分别装有等量的抗D凝胶、抗C凝胶、抗c凝胶、抗E凝胶、抗e凝胶和空白凝胶，其通过以下方法制备而成：葡聚糖凝胶的溶胀、制备各抗体稀释液、制备各抗体工作液、凝胶洗涤、分装形成Rh血型检测卡。本发明采用不同大小、不同筛分范围的交联葡聚糖凝胶进行混合，并用纯化水进行溶胀，有效地保证特异性的同时还拥有很高的灵敏度，并有效保证了体系的离子强度。

主权项

一种Rh血型检测卡，包括含有六个微柱的检测卡，所述六个微柱内分别装有等量的抗D凝胶、抗C凝胶、抗c凝胶、抗E凝胶、抗e凝胶和空白凝胶，其特征在于：通过以下方法制备而成：（1）葡聚糖凝胶的溶胀：选用至少两种交联葡聚糖凝胶进行混合，然后加入纯化水中进行充分悬浮溶胀，再用纯化水洗涤去除破碎颗粒，得到大小均匀、呈完整球形的葡聚糖凝胶颗粒；（2）制备各抗体稀释液：抗D稀释液：以磷酸盐缓冲液为基液，其中含有乙二胺四乙酸二钾盐10‑15g/L、牛血清白蛋白35‑40g/L，稀释液的pH值为6.6‑6.8；抗C稀释液：以生理盐水为基液，其中含有乙二胺四乙酸二钾盐15‑20g/L、牛血清白蛋白25‑28g/L，pH值为6.6‑6.8；抗c稀释液：以生理盐水为基液，其中含有乙二胺四乙酸二钾盐12‑18g/L、牛血清白蛋白40‑45g/L，pH值为6.6‑6.8；抗E稀释液：以磷酸盐缓冲液为基液，其中含有乙二胺四乙酸二钾盐15‑25g/L、牛血清白蛋白20‑25g/L，pH值为6.6‑6.8；抗e稀释液：以磷酸盐缓冲液为基液，其中含有乙二胺四乙酸二钾盐10‑15g/L、牛血清白蛋白25‑35g/L，pH值为6.6‑6.8；空白凝胶洗涤缓冲液：以纯化水为溶剂，缓冲液中含有氯化钠1.75‑2.07g/L、磷酸氢二钠0.185‑0.219g/L、磷酸二氢钠0.203‑0.24g/L、甘氨酸18‑21g/L；并调节 pH值为6.6‑6.8；（3）制备各抗体工作液：取抗D单克隆抗体浓缩液与抗D稀释液进行混合，使得到的抗D单克隆抗体工作液的效价≥64；取抗C单克隆抗体浓缩液与抗C稀释液混合，使得到的抗C单克隆抗体工作液的效价≥16；取抗c单克隆抗体浓缩液与抗c稀释液混合，使得到的抗c单克隆抗体工作液的效价≥16；取抗E单克隆抗体浓缩液与抗E稀释液混合，使得到的抗E单克隆抗体工作液的效价≥16；取抗e单克隆抗体浓缩液与抗e稀释液混合，使得到的抗e单克隆抗体工作液的效价≥16；（4）凝胶洗涤：取等量的葡聚糖凝胶颗粒分别用等量的抗D稀释液、抗C稀释液、抗c稀释液、抗E稀释液、抗e稀释液和空白凝胶洗涤缓冲液进行洗涤至少三次，再加入相对应的抗D单克隆抗体工作液、抗C单克隆抗体工作液、抗c单克隆抗体工作液、抗E单克隆抗体工作、抗e单克隆抗体工作液和空白凝胶洗涤缓冲液进行混合，得到抗D凝胶、抗C凝胶、抗c凝胶、抗E凝胶、抗e凝胶和空白凝胶；（5）分装：按照每管24‑32微升的量，将抗D凝胶、抗C凝胶、抗c凝胶、抗E凝胶、抗e凝胶和空白凝胶依次加到空白检测卡的六个微柱中，形成Rh血型检测卡。