[发明专利]一种非诊断目的检测淋巴细胞增殖情况的方法及其试剂盒在审
| 申请号： | 201410786994.4 | 申请日： | 2014-12-17 |
| 公开（公告）号： | CN104458539A | 公开（公告）日： | 2015-03-25 |
| 发明（设计）人： | 赵晓东;秦涛 | 申请（专利权）人： | 重庆医科大学附属儿童医院 |
| 主分类号： | G01N15/10 | 分类号： | G01N15/10;G01N33/58 |
| 代理公司： | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人： | 赵青朵 |
| 地址： | 400014 *** | 国省代码： | 重庆;85 |
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| 摘要： | 本发明涉及细胞增殖检测领域，特别涉及一种非诊断目的检测淋巴细胞增殖情况的方法及其试剂盒。该方法包括：将第一待测血液样本与淋巴细胞多克隆激活剂混合，经细胞培养，获得第一血液细胞；将荧光标记的淋巴细胞表面标记抗体与第一血液细胞进行孵育，裂解红细胞，加入绝对计数用微球，采用流式细胞术检测淋巴细胞数量和绝对计数用微球数量，根据淋巴细胞数量、绝对计数用微球数量和绝对计数用微球浓度获得刺激组淋巴细胞的浓度。本发明不仅可检测淋巴细胞各亚群的增殖比例，还可检测淋巴细胞各亚群增殖的绝对值，可准确反应淋巴细胞的增殖情况；使用全血进行增殖实验，不需要分离PBMC，血标本量要求很小；操作步骤简易，耗时短，误差较小。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 诊断 目的 检测 淋巴细胞 增殖 情况 方法 及其 试剂盒 | ||
【主权项】：
一种非诊断目的检测淋巴细胞增殖情况的方法，其特征在于，包括如下步骤：将第一待测血液样本与淋巴细胞多克隆激活剂混合，经细胞培养，获得第一血液细胞；将荧光标记的淋巴细胞表面标记抗体与所述第一血液细胞进行孵育，裂解红细胞，加入绝对计数用微球，采用流式细胞术检测淋巴细胞数量和绝对计数用微球数量，根据所述淋巴细胞数量、所述绝对计数用微球数量和绝对计数用微球浓度获得刺激组淋巴细胞的浓度；将第二待测血液样本进行细胞培养，获得第二血液细胞；将荧光标记的淋巴细胞表面标记抗体与所述第二血液细胞进行孵育，裂解红细胞，加入绝对计数用微球，采用流式细胞术检测淋巴细胞数量和绝对计数用微球数量，根据所述淋巴细胞数量、所述绝对计数用微球数量和绝对计数用微球浓度获得未刺激组淋巴细胞的浓度；比较所述刺激组淋巴细胞的浓度与所述未刺激组淋巴细胞的浓度，获得淋巴细胞增殖情况；所述第一待测血液样本与所述第二待测血液样本的来源相同。
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