[发明专利]一种检测邻苯二甲酸单甲酯的方法及试剂盒在审
| 申请号： | 201410688100.8 | 申请日： | 2014-11-25 |
| 公开（公告）号： | CN104480073A | 公开（公告）日： | 2015-04-01 |
| 发明（设计）人： | 可尘娟;李慧;袁均林;丁书茂;杨旭;李睿;陈明清 | 申请（专利权）人： | 华中师范大学 |
| 主分类号： | C12N5/20 | 分类号： | C12N5/20;G01N33/577;C12R1/91 |
| 代理公司： | 武汉科皓知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 42222 | 代理人： | 常海涛 |
| 地址： | 430079 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种检测邻苯二甲酸单甲酯的方法及试剂盒，属于生物检测领域。本发明通过化学方法合成了MMP人工抗原，再用MMP人工抗原免疫BALB/c小鼠，取免疫小鼠的脾细胞与SP2/0细胞融合筛选得到分泌MMP单克隆抗体的杂交瘤细胞株；再以合成的MMP人工抗原作为包被抗原、MMP单克隆抗体作为一抗创建了检测MMP的间接竞争ELISA方法和试剂盒，可用于样品中的MMP测定，该方法具有操作简单、费用低廉、快速灵敏等优点。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 检测 邻苯二 甲酸 单甲酯 方法 试剂盒 | ||
【主权项】：
一种分泌邻苯二甲酸单甲酯单克隆抗体的杂交瘤细胞株，其特征在于通过包含如下步骤的方法制备得到：(1)取用MMP人工抗原免疫BALB/c小鼠的脾细胞与SP2/0细胞悬液混合；(2)离心弃上清，在聚乙二醇作用下进行细胞融合，然后用DMEM培养基来终止反应，重复该步骤；(3)离心弃上清，加入HAT培养基，铺至细胞板中进行培养；(4)融合后第7天观察，标出有融合细胞的孔，记录位置和克隆数，补加HAT培养基；2周后，全量换液，待细胞长至板底1/10时做检测；(5)选择效价最高的并且对MMP具有特异性的阳性细胞进行克隆，克隆化结束后，建株得到分泌MMP单克隆抗体的杂交瘤细胞株。
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