[发明专利]一种高得率的云芝多糖的制备方法

摘要

本发明公开了一种高得率的云芝多糖的制备方法，通过合适的酶解、醇沉技术、利用聚合物/无机盐双水相体系、大孔吸附树脂除杂、超滤膜进行过滤等步骤来提高云芝多糖的提取率，将经过本发明提取的云芝多糖含量与用酶解法得到的云芝含量进行对比，云芝多糖含量平均增加21％。

主权项

一种高得率的云芝多糖的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将云芝子实体晾干至水分含量为15～20％，然后进行粉碎处理，得到200～300目的云芝粉，与蒸馏水按1：30‑40的重量比混合成混合液后，备用；(2)酶解处理：取占混合液重量0.1‑0.2％的纤维素酶加入混合液中，调解pH值至4‑6，在搅拌的过程中于40‑55℃酶解40‑80分钟；(3)将云芝粉进行微波辅助热水提取，所述的微波功率为500‑700W，提取时间为3‑5分钟；然后继续进行超声波辅助热水提取，其超声温度20‑60℃，功率为600‑800W，超声时间为20‑60min；然后将所得的云芝水提液冷却至室温，离心分离得上清液和云芝残渣；(4)醇沉多糖：将步骤(3)所得上清液减压浓缩，加入2‑4倍体积的无水乙醇进行醇沉后，离心，冷冻高燥后得云芝粗多糖；(5)双水相萃取：将云芝粗多糖溶于水，得粗多糖溶液，加入聚合物/无机盐双水相体系中，在温度30‑50℃、pH 4‑7的条件下震荡30‑50分钟，震荡速度为100‑200r·min^‑1，然后静置20‑40分钟分层；所述的聚合物为聚乙二醇，无机盐为磷酸钾；所述的聚乙二醇浓度为10‑20％，磷酸钾的浓度15‑25％；(6)取出富含无机盐的下层，采用大孔吸附树脂以2‑4BV/h的流速对所得云芝粗多糖以5‑10倍柱体积水进行洗脱除杂，洗脱流速为1‑4BV/h，之后，调节pH值范围为6.5‑7.5，采用阴阳离子交换树脂串联树脂柱脱蛋白处理；所述的阴离子交换树脂与阳离子树脂的质量比为1:2～5；(7)用截留量为6000的超滤膜除盐，截留分子量范围为100000‑800000D，工作压力为0.2‑0.7Mpa，温度为30‑50℃，转子的转速为300‑800r/min，收集截留浓缩液，并用蒸馏水清洗，合并洗液与浓缩液，干燥，得到云芝多糖。