[发明专利]抗麻疹与百白破四价卵黄抗体制剂的制备工艺

摘要

抗麻疹与百白破四价卵黄抗体制剂的制备工艺，包括如下步骤：免疫接种疫苗鸡的选择-免疫接种疫苗制备及剂量-免疫程序-卵黄分离方法与技巧-卵黄抗体水溶性组分液（WSF）制备-卵黄抗体分离提取-卵黄抗体提取物无菌处理-PEG溶液配制-透析袋处理。本发明从鸡蛋中制备高纯度和高效价的百白破的特异性卵黄抗体IgY,鸡蛋作为正常的膳食成分其IgY是没有毒副作用的，提纯的IgY是现代理想的免疫增强剂和治疗剂，制备方便，安全可靠，可用于人群麻疹与百白破的预防和治疗，特别是儿童暴露下的紧急预防和治疗。

主权项

 抗麻疹与百白破四价卵黄抗体制剂的制备工艺，其特征在于：该工艺包括如下步骤：1）免疫接种疫苗鸡的选择：选择健康状态良好，17‑18周龄粤禽鸡；2）免疫接种疫苗制备及剂量：麻疹疫苗与百白破疫苗1：1比例混合，每只鸡免疫接种人用麻疹疫苗每次量为0.75ml；3）免疫程序：免疫途径为皮下注射，免疫次数为4次，免疫时间为第1次与第2次间隔为3天，第3次与第4次间隔为7天，免疫注射技巧为3点注射；4）卵黄分离方法与技巧：用75%酒精浸泡鸡蛋5‑10分钟，取出鸡蛋用清水冲洗，干净纱布将蛋壳擦干，用剪刀打开蛋壳一个小孔，让蛋清缓慢流出，顺流尽蛋清，打开蛋壳，小心将整个蛋黄移至灭菌滤纸上，来回流动，除尽蛋清，取蛋黄加入量杯，记录卵黄量；5）卵黄抗体水溶性组分液（WSF）制备：按卵黄量的8倍加入灭菌的双蒸水，用0.1M HCl调卵黄稀释液PH为5.0‑5.1，放置在4℃环境下搅拌8小时取出，在4℃环境下将卵黄稀释液放入离心机中以10000‑12000转/分钟，离心15分钟,收取得卵黄抗体水溶性组分液上清液；6）卵黄抗体分离提取方法：将卵黄抗体水溶性组分液上清液加入8%PEG6000 100ml，搅拌30分钟，然后在4℃环境下放入离心机中以10000‑12000转/分钟，离心15分钟,收集沉淀，去上清液，沉淀装入透析袋透析；7）卵黄抗体提取物无菌处理：将直径0.22µm过滤膜装入滤器，高压蒸汽灭菌后抗体提取物过滤，即为无菌抗体，将卵黄抗体置‑20℃保存备用，保存期2年；8）PEG溶液配制：用PBS(0.01mol/L PH7.4)配制；9）透析袋处理：将透析袋放入300ml透析处理液（2%NaHCO₃、1mmol/L EDTA,PH 8.0）中煮沸10分钟后，以蒸馏水彻底漂洗后再用300ml（PH 8.0）1mmol/LEDTA液中煮沸10分钟，最后用灭菌的双蒸水里外彻底冲洗。