[发明专利]一种监控总RNA中线状RNA消除的方法有效
申请号: | 201410606600.2 | 申请日: | 2014-10-31 |
公开(公告)号: | CN104328185A | 公开(公告)日: | 2015-02-04 |
发明(设计)人: | 周俊飞;李利利;陈利红;高利芬;张继;方治伟;章伟雄;卢龙;李甜甜;彭海 | 申请(专利权)人: | 江汉大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 北京三高永信知识产权代理有限责任公司 11138 | 代理人: | 徐立 |
地址: | 430056 湖北省武汉市*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明公开了一种监控总RNA中线状RNA消除的方法。所述方法包括:人工合成外源线性ERCC-0004-RNA和外源环状ERCC-0013-RNA;对外源环状ERCC-0013-RNA进行质量控制;将外源线性ERCC-0004-RNA和外源环状ERCC-0013-RNA按等摩尔比混合,得到混合外源RNA;向待检样本的总RNA中加入混合外源RNA,得到第一混合物;去除第一混合物中的核糖体RNA,得到第二混合物;去除第二混合物中的线性RNA,线性RNA包括总RNA中的线性RNA和外源线性ERCC-0004-RNA,得到第三混合物;分别检测第一混合物和第三混合物中的外源线性ERCC-0004-RNA和外源环状ERCC-0013-RNA的含量;根据含量计算总RNA中线性RNA的去除比例。所述方法能够有效监控总RNA中线性RNA的去除程度。 | ||
搜索关键词: | 一种 监控 rna 线状 消除 方法 | ||
【主权项】:
一种监控总RNA中线状RNA消除的方法,其特征在于,所述方法包括:人工合成外源线性ERCC‑0004‑RNA和外源环状ERCC‑0013‑RNA;对所述外源环状ERCC‑0013‑RNA进行质量控制;将所述外源线性ERCC‑0004‑RNA和所述外源环状ERCC‑0013‑RNA按等摩尔比混合,得到混合外源RNA;向待检样本的总RNA中加入所述混合外源RNA,所述总RNA与所述混合外源RNA的质量比为2000:1,得到第一混合物;去除所述第一混合物中的核糖体RNA,得到第二混合物;去除所述第二混合物中的线性RNA,所述线性RNA包括所述总RNA中的内源线性RNA和所述外源线性ERCC‑0004‑RNA,得到第三混合物;分别检测所述第一混合物中的所述外源线性ERCC‑0004‑RNA和所述外源环状ERCC‑0013‑RNA的含量、以及所述第三混合物中的所述外源线性ERCC‑0004‑RNA和所述外源环状ERCC‑0013‑RNA的含量;根据所述含量计算所述总RNA中所述线性RNA的去除比例。
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