[发明专利]蛋白质表面重建

摘要

本发明涉及蛋白质表面重建。聚集是蛋白质不良表现的主要原因。本发明提供一种修饰蛋白质以产生更稳定的变异体的系统。所述方法包括鉴别蛋白质表面上适合于突变为更亲水的残基(例如，带电氨基酸)的非保守疏水性氨基酸残基。可改变表面上任何数目的残基来产生更可溶、抗聚集、重折叠能力更高和/或在多种条件下更稳定的变异体。本发明还提供本发明技术所产生的理论净电荷增加的GFP、链霉亲和素以及GST变异体。还提供用于对任何所关注蛋白质进行所述修饰的试剂盒。

主权项

一种野生型蛋白的超带电蛋白质变体，其中所述超带电蛋白质变体包括与野生型序列相比经修饰的一级氨基酸序列，导致所述超带电蛋白质变体上的净电荷为：生理pH值下‑10至‑40，其中所述超带电蛋白质变体在生理pH值下所带净电荷比野生型蛋白减小了至少‑3；或生理pH值下+10至+52，其中所述超带电蛋白质变体在生理pH值下所带净电荷比野生型蛋白增加了至少+3；其中所述经修饰的一级氨基酸序列包括用在生理pH值下带正电或带负电的天然氨基酸残基置换多个非保守表面残基；以及其中所述非保守表面残基通过比较所述蛋白质的氨基酸序列与来自同一蛋白质家族或来自不同物种的蛋白质的至少一个其它氨基酸序列来鉴定，其中如果在特定位置上有小于或等于50％的氨基酸序列为相同的氨基酸序列，那么残基就是非保守的。