[发明专利]以生物柴油副产物粗甘油为碳源的微生物油脂制备方法

摘要

本发明提供一种以生物柴油副产物粗甘油为碳源的微生物油脂制备方法，属于微生物油脂制备技术领域。该方法利用生物柴油副产物粗甘油为碳源，粘红酵母32489为产油微生物制备微生物油脂，解决了葡萄糖或纯甘油（AR）作为碳源制备微生物油脂成本较高的问题，也使粗甘油得到有效利用；生成的微生物油脂和植物油的成分几乎一致。与植物油相比，微生物油脂具有制备周期短，不需占用耕地等优势，是制备生物柴油的非粮生物质廉价原料，可降低生物柴油制备成本，具有较大的应用前景。

主权项

一种以生物柴油副产物粗甘油为碳源的微生物油脂制备方法，其特征在于 ：该方法 具体步骤如下 ： （1）将活化好的粘红酵母放入灭菌后的葡萄糖接种培养基中，在摇床中培养 24 小时 ；所述步骤（1）中的葡萄糖接种培养基的pH为5.8‑6.0，葡萄糖接种培养基灭菌的 温度为 121℃，灭菌时间为 30min，摇床培养时，摇床的转速为 180‑220r/min；（2）将步骤（1）中培养好的接种液按一定比例加入到灭菌后的粗甘油发酵培养基中，在 摇床中培养数天 ；（3）将步骤（2）中发酵后得到的粘红酵母放在离心机中，在一定的转速下离心，取下层 细菌放入烘箱中，在一定温度下烘干至恒重 ； （4）将步骤（3）中得到的烘干后的粘红酵母放入离心管中，加入一定量的盐酸，置于振 荡器混匀后在室温放置一段时间，再在沸水浴中煮一定时间，然后放入 ‑20℃的冰箱速冷将 粘红酵母菌体破碎 ；（5）将步骤（4）中破碎后的菌液中加入 2 倍体积的氯仿 ‑ 甲醇溶液，震荡混匀，放入离 心机中在一定转速下离心，取下层氯仿溶液转移至蒸馏瓶中，用旋转蒸发器挥发出氯仿层， 得到最终产品微生物油脂；其中，所述粗甘油发酵培养基的组成为 ：粗甘油 40g/L，（NH4）2SO45g/L， KH2PO41g/L，酵母浸粉 0.5g/L，MgSO40.5g/L ；其中，粗甘油是以 NaOH、对甲苯磺酸或者离子 交换树脂作为催化剂，餐饮废油和混合甲乙醇制备生物柴油后剩余的混合液，混合液成分为 ：甘油40%，甲醇22%，乙醇13%，水20%，脂肪酸钠2%，脂肪酸酯2%，NaCl 1%；所述粘红酵母为粘红酵母 32489，购自中国工业微生物菌种保藏管理中心。