[发明专利]一种长春碱的提取及纯化方法

摘要

本发明公开了一种长春碱的提取及纯化方法，包括将长春花进行盐浸、冷冻干燥预处理；预处理的原料酸性提取，然后萃取加硫酸得硫酸长春碱粗品；将硫酸长春碱粗品碱化萃取、水洗、上硅胶柱分离、结晶，得长春碱纯品。本发明步骤简洁、耗用时间少，先对长春花进行预处理再进行提取，即可以除掉长春花部分溶于水的色素杂质，又使长春花细胞壁破碎，更利于产品的溶出。通过对提取步骤和条件的选择，提高了粗品的得率和含量，通过对各提取试剂、萃取试剂、洗脱试剂和结晶试剂的选择，提高了长春碱的收率和纯度，通过一次结晶即可得到长春碱纯品，简化了纯化过程，更为快速的实现了长春碱的分离和纯化，且最终得到的产品纯度高，更为满足临床需求。

主权项

一种长春碱的提取及纯化方法，其特征是包括以下步骤：（1）取长春花，用15‑25wt%的氯化钠水溶液超声浸泡15min，然后取出直接放入流速为5‑8m/s的‑20℃的冷空气中冷冻干燥20min，冷冻干燥后将长春花粉碎；（2）将步骤（1）的长春花加入30体积%乙醇中，用柠檬酸调节pH为1.5，回流提取，过滤取滤液，将滤液用氢氧化钠调整pH为8‑9，然后以喷雾的形式从萃取罐顶部喷入，同时将萃取剂以喷雾的形式从萃取罐的底部喷入，喷入完毕萃取收集有机相；所述萃取剂为体积比为10:1‑2.5的三氯乙烯和己烷的混合物；（3）有机相减压除去溶剂，固体用乙醇完全溶解，加浓度5wt%的硫酸的乙醇溶液调节pH为3.8，离心、干燥得硫酸长春碱粗品；（4）将硫酸长春碱粗品用水溶解，加饱和碳酸氢钠溶液调节pH为8‑9，加入二氯甲烷萃取，二氯甲烷有机相用水洗涤直至洗涤后的水相透明无色，收集水洗后的有机相，减压蒸馏除去二氯甲烷，所得剩余物上硅胶柱，用体积比为90：10～98：2的二氯甲烷与甲醇氨饱和溶液的混合物作为流动相进行洗脱，收集无色流份，将流份减压蒸馏至干，所得固体加入体积比为9：0.3‑0.8：1‑3的甲醇、石油醚和乙酸乙酯的混合液中，常温超声5min，然后在‑10℃低温静置24h，所得晶体在‑10℃低温抽滤，‑10℃冻干，得长春碱纯品；步骤（2）中，滤液与萃取剂的体积比为3.5:1～6:1。