[发明专利]基因全片段快速测序方法无效
申请号: | 201410429092.5 | 申请日: | 2014-08-27 |
公开(公告)号: | CN104232761A | 公开(公告)日: | 2014-12-24 |
发明(设计)人: | 王凯;汪锋;赵倩;贾海英 | 申请(专利权)人: | 武汉凯吉盈科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 武汉河山金堂专利事务所 42212 | 代理人: | 胡清堂 |
地址: | 430000 湖北省武汉市高*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明提供了基因全片段(>50kb)快速测序方法,该方法包括以下步骤:(1)采用PrimeSTAR GXL DNA酶,在相同PCR条件下扩增不同基因片段,所述PCR条件优选96℃~100℃变性5~15sec,66℃~70℃退火延伸6~10min,25~35个循环;(2)标准化PCR产物;(3)制备测序文库;(4)基因测序。使用本方法可在相同PCR条件下扩增不同长度基因片段和不同Tm值的引物,相同退火温度及延伸时间即可成功扩增出目的片段,结合MiSeq平台进行测序,为长链PCR与新一代基因测序技术的结合应用提供了一种24小时内生成结果的快速有效的方法。 | ||
搜索关键词: | 基因 片段 快速 方法 | ||
【主权项】:
基因全片段快速测序方法,该方法包括以下步骤:(1)采用PrimeSTAR GXL DNA酶,在相同PCR条件下扩增不同基因片段,所述PCR条件优选96℃~100℃变性5~15sec,66℃~70℃退火延伸6~10min,25~35个循环;(2)标准化PCR产物;(3)制备测序文库;(4)基因测序。
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