[发明专利]一种快速检测常见缺失型α-地中海贫血的试剂盒及其使用方法

摘要

本发明公开了一种快速检测常见缺失型α-地中海贫血的试剂盒及其使用方法。所述试剂盒包括：一对可以同时扩增α-珠蛋白基因簇中Y1区段的特征序列y1和Y2区段的特征序列y2的引物，一对扩增α-珠蛋白基因簇中--SEA基因型的引物，一对扩增α-珠蛋白基因簇中α2基因的引物、一条特异性检测Y1区段的特征序列y1的荧光探针、一条特异性检测Y2区段的特征序列y2的荧光探针、一条特异性检测--SEA基因型扩增产物的荧光探针和一条特异性检测α2基因扩增产物的荧光探针。本发明所述试剂盒对α-地中海贫血珠蛋白基因缺失检测具有高度的灵敏性、稳定性、准确性以及较高的特异性。

主权项

一种快速检测常见缺失型α‑地中海贫血的试剂盒，包括扩增引物和荧光探针，其特征在于：所述的扩增引物为：一对可以同时扩增α‑珠蛋白基因簇中Y1区段的特征序列y1和Y2区段的特征序列y2的引物Y1Y2‑F和Y1Y2‑R，一对扩增α‑珠蛋白基因簇中‑‑SEA基因型的Gap‑PCR引物SEA‑F和SEA‑R，以及一对扩增α‑珠蛋白基因簇中α2基因的引物A2‑F和A2‑R；所述的荧光探针为：一条特异性检测Y1区段的特征序列y1的荧光探针Y1‑Prob，一条特异性检测Y2区段的特征序列y2的荧光探针Y2‑Prob，一条特异性检测‑‑SEA基因型扩增产物的荧光探针SEA‑Prob，以及一条特异性检测α2基因扩增产物的荧光探针A2‑Prob；其中：所述的可以同时扩增α‑珠蛋白基因簇中Y1区段的特征序列y1和Y2区段的特征序列y2的引物对中，Y1Y2‑F:5’‑TGCACCCACTGGCACTC‑3’；Y1Y2‑R:5’‑AGGAAGGAAGGGGTGGACT‑3’；所述的扩增α‑珠蛋白基因簇中‑‑SEA基因型的Gap‑PCR引物对中，SEA‑F:5’‑AGAAGCTGAGTGATGGGTCC‑3’；SEA‑R:5’‑TGGACTTAAGTGATCCTCCTGC‑3’；所述的扩增α‑珠蛋白基因簇中α2基因的引物对中，A2‑F:5’‑TCCTGGCTTCTGTGAGCAC‑3’；A2‑R:5’‑GCAGAGAGGTCCTTGGTCTG‑3’；所述的特异性检测Y1区段的特征序列y1的荧光探针Y1‑Prob为：Y1‑Prob:5’‑6‑FAM‑CACCTCCCACCCTTCCCCAGA‑BHQ‑1‑3’；所述的特异性检测Y2区段的特征序列y2的荧光探针Y2‑Prob为：Y2‑Prob:5’‑ROX‑CTCCCACCCTCCCCCTCGCCA‑BHQ‑2‑3’；所述的特异性检测‑‑SEA基因型扩增产物的荧光探针SEA‑Prob为：SEA‑Prob:5’‑HEX‑CTTCGCAGGAACTCGGTCGTCCC‑BHQ‑1‑3’；所述的特异性检测α2基因扩增产物的荧光探针A2‑Prob为：A2‑Prob:5’‑CY5‑ACCTCCATTGTTGGCACATTCCGGGA‑BHQ‑2‑3’。