[发明专利]一种二肽基肽酶IV抑制肽及其制备和应用

摘要

本发明涉及一种二肽基肽酶IV抑制剂及其制备，其以鹿胶原肽为活性成份，具有二肽基肽酶IV抑制活性。通过本发明制备的二肽基肽酶IV抑制剂，可应用于食品添加剂、功能食品、药品等领域，具有良好的应用前景。

主权项

1.一种二肽基肽酶IV抑制剂，其特征在于：其以鹿胶原肽为活性成份，鹿胶原肽具有二肽基肽酶IV抑制活性；所述二肽基肽酶IV抑制剂的制备方法为：（1）以新鲜的鹿皮或鹿筋中的一或二种以上为原料，将鹿皮或鹿筋于1～30% NaOH 中50～100℃煮10～30分钟进行脱脂处理后用纯水清洗干净，剪为2～3平方厘米的碎片，鹿皮或鹿筋碎片按照原料：缓冲液1:1～100质量比加入0.01～1M缓冲液，再按酶：原料1:10～500质量比加入蛋白酶进行单酶酶解，于20～50℃搅拌反应1～10小时；将上述反应液的pH用0.1～1M NaOH或0.1～1M HCl调至6～8，加入复合酶进行酶解，加酶量为反应物质量的0.1～1%，于20～70℃搅拌反应1～10小时，反应结束后70～100℃灭活5～30min；将上述反应液2000～8000rpm离心3～10min，收集上清，冷冻干燥得到鹿胶原肽；（2）干燥的鹿胶原肽用其质量3～5倍10～50%甲醇水溶液或缓冲液溶解，上Sephadex 系列凝胶柱，用甲醇水溶液或缓冲液淋洗分离并收集洗脱液，含量最高的组分为具有二肽基肽酶IV抑制活性的组分；所述单酶酶解所用的蛋白酶为胃蛋白酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶其中一种；所述复合酶为胰蛋白酶、风味蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、碱性蛋白酶或中性蛋白酶其中两种、三种、四种或五种酶组合使用，复合酶中单酶以相同的质量比例混合。