[发明专利]一种利用二倍体细胞与花粉细胞融合育种法培育三倍体霍山石斛的方法有效
| 申请号： | 201410343440.7 | 申请日： | 2014-07-18 |
| 公开（公告）号： | CN104429939B | 公开（公告）日： | 2016-12-14 |
| 发明（设计）人： | 邓辉;姚厚军;张德华;杨国栋;陈乃东 | 申请（专利权）人： | 皖西学院 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 合肥市浩智运专利代理事务所(普通合伙)34124 | 代理人： | 丁瑞瑞 |
| 地址： | 237012 安*** | 国省代码： | 安徽;34 |
| 权利要求书： | 暂无信息 | 说明书： | 暂无信息 |
| 摘要： | 本发明公开了一种利用二倍体细胞与花粉细胞融合育种法培育三倍体霍山石斛的方法。该方法包括(1)优选出抗逆性好、生长快、茎秆粗、茎高长、分蘖多、纤维含量低、药效成分含量高的不同产地的霍山石斛品种作为三倍体培育源植株亲本；(2)对源植株种子在固体培养基中进行无菌播种，获得原球茎；(3)对源植株花粉在固体培养基中进行无菌培养，获得花粉细胞群；(4)制备花粉细胞和原球茎细胞的原生质体，进行细胞融合；(5)在固体培养基上对融合细胞进行培养分化成幼株，检测出三倍体植株；(6)对三倍体植株进行组培，获得大量三倍体幼苗。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 利用 二倍 体细胞 花粉 细胞融合 育种 培育 三倍 霍山 石斛 方法 | ||
【主权项】：
一种利用二倍体细胞与花粉细胞融合育种法培育三倍体霍山石斛的方法，其特征在于包括以下步骤：(1)优选出抗逆性好、株型大、生长快、药效成分含量高的不同产地的霍山石斛品种作为三倍体培育源植株；(2)对源植株种子在大量元素减半的1/2MS固体培养基中进行无菌播种，所述大量元素减半的1/2MS固体培养基中，调整蔗糖浓度为5％‑8％，添加10‑15％的椰乳，2,4‑D 0.2‑2.0mg/L,NAA 0.2‑2.0mg/L；培养温度在25‑18℃的昼夜温差范围内，光照时间10‑12小时，光照强度2000‑3000Lux，色温4500‑5500k，最终获得原球茎；(3)对源植株花粉在大量元素减半的1/2MS固体培养基中进行无菌播种，所述大量元素减半的1/2MS固体培养基中，调整蔗糖浓度为5％‑8％，添加10‑15％的椰乳，2,4‑D 0.2‑2.0mg/L,NAA 0.2‑2.0mg/L；培养温度在25‑18℃的昼夜温差范围内，光照时间10‑12小时，光照强度2000‑3000Lux，色温4500‑5500k，最终获得花粉细胞群；(4)制备花粉细胞和原球茎细胞的原生质体，进行细胞融合；(5)在普通固体培养基上对融合细胞进行培养分化成幼株，检测出三倍体植株；(6)对三倍体植株进行无性组培，获得大量三倍体幼苗。
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