[发明专利]一种筛选和鉴定miRNAs所调控的基因的方法无效
申请号: | 201410326335.2 | 申请日: | 2014-07-10 |
公开(公告)号: | CN104087669A | 公开(公告)日: | 2014-10-08 |
发明(设计)人: | 向双林;魏科;颜峰;胡翔;张健 | 申请(专利权)人: | 湖南师范大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 长沙永星专利商标事务所 43001 | 代理人: | 周咏;林毓俊 |
地址: | 410081 湖*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | 本发明建立了一种直接筛选和鉴定出miRNAs调控的基因组DNA的方法。该方法是将生物素标记到研究的目的miRNAs上,利用生物素和链霉亲和素之间的亲和力将生理状况下与生物素标记的miRNAs靶向结合在一起的基因组DNA分离和纯化出来,然后将分离纯化的DNA进行克隆和测序获得DNA序列信息,通过生物信息学分析DNA序列所在的基因位置和基因名称,获得调控基因组DNA的miRNAs的所有靶标基因。通过本发明建立的方法可以应用到所有靶向基因组DNA的miRNAs的功能研究。 | ||
搜索关键词: | 一种 筛选 鉴定 mirnas 调控 基因 方法 | ||
【主权项】:
一种筛选和鉴定miRNAs所调控的基因的方法,其特征在于包括:(1)将miRNAs与靶基因组DNA互补结合的RNA链进行生物素标记,转染细胞后,利用甲醛将miRNAs和与之结合的DNA、蛋白交联在一起;(2)将生物素标记的miRNAs以及结合在一起的DNA进行Streptavidin‑Biotin亲和沉淀分离和纯化;(3)通过克隆和测序鉴定分离纯化出来的DNA序列,鉴定出miRNAs调控的靶基因。
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