[发明专利]基于TALEN和pMD18载体的定点突变系统及应用在审
| 申请号： | 201410299205.4 | 申请日： | 2014-06-26 |
| 公开（公告）号： | CN104212778A | 公开（公告）日： | 2014-12-17 |
| 发明（设计）人： | 宋春娇;茹国美;郎娟;郭艳;张林 | 申请（专利权）人： | 绍兴市人民医院 |
| 主分类号： | C12N9/22 | 分类号： | C12N9/22;C12N15/85 |
| 代理公司： | 绍兴市越兴专利事务所 33220 | 代理人： | 王余粮 |
| 地址： | 312000 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明涉及基于TALEN和pMD18载体的定点突变系统及应用，由核酸酶TALEN和pMD18载体组成，核酸酶TALEN为剪切目的基因靶序列的转录激活子样效应因子，TALEN由识别所述靶序列5’端的核酸酶TALEN-L和识别所述靶序列3’端的核酸酶TALEN-R组成；pMD18载体为插入人类AR定点突变基因的pMD18同源重组模板质粒，pMD18载体由靶基因的相应上下游序列和嘌呤霉素筛选标记组成。本发明使细胞基因组在TALEN切断双链DNA分子时，利用pMD18载体提供的同源序列，高效精确地对基因组进行编辑；采用导入同源序列以重新编辑DNA序列的同时，带入嘌呤霉素抗性基因，从而大大简化筛选过程中的人工劳动。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 talen pmd18 载体 定点 突变 系统 应用 | ||
【主权项】：
一种基于TALEN和pMD18载体的定点突变系统，其特征在于：由核酸酶TALEN和pMD18载体组成，所述核酸酶TALEN为剪切目的基因靶序列的转录激活子样效应因子，TALEN由识别所述靶序列5’端的核酸酶TALEN‑L和识别所述靶序列3’端的核酸酶TALEN‑R组成；所述pMD18载体为插入人类AR定点突变基因的pMD18同源重组模板质粒，pMD18载体由靶基因的相应上下游序列和嘌呤霉素筛选标记组成。
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