[发明专利]用于制备LRRC52多克隆抗体的免疫原有效

专利信息
申请号: 201410295554.9 申请日: 2014-06-27
公开(公告)号: CN104211798B 公开(公告)日: 2016-11-09
发明(设计)人: 曾旭辉;郑莉萍;罗韬;王涛;陈莹;王华锋 申请(专利权)人: 南昌大学
主分类号: C07K14/47 分类号: C07K14/47;C07K16/18;C07K16/06;A61K39/395;A61P15/16
代理公司: 南昌新天下专利商标代理有限公司 36115 代理人: 施秀瑾;刘华
地址: 330031 江西省*** 国省代码: 江西;36
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摘要: 发明属于生物技术领域,涉及用于制备LRRC52多克隆抗体的免疫原,为多肽,其氨基酸序列为CQNNRIREVM DYTFI。本免疫原制备的LRRC52多克隆抗体具有效价高、特异性好的优点。其与小鼠或人精子孵育可显著抑制精子钾电流的产生,从而显著影响小鼠和人成熟精子的生理功能。该抗体既能作为研究精子生理调节机制的工具药,也可以作为开发新型男性避孕药的候选分子。
搜索关键词: 用于 制备 lrrc52 克隆 抗体 免疫原
【主权项】:
LRRC52多克隆抗体的制备方法,其特征在于包括如下步骤: (1)合成目的多肽CQNNRIREVM DYTFI,将合成后的多肽溶于乙腈; (2)取体重2 Kg以上的新西兰兔为免疫动物,用400μl 0.01M磷酸缓冲溶液溶解400 μg上述合成多肽,与弗式完全佐剂进行等比例混合,充分震荡乳化,将该乳剂作为免疫原在兔子背部行多点皮下注射,注射20‑40个点; (3)首次免疫3周后,将300 μg合成多肽溶于300μl 0.01M磷酸缓冲溶液溶解,与等体积弗式不完全佐剂充分乳化后作为免疫原进行背部皮内注射,作为第一次免疫的加强免疫,注射15‑25个点以上; (4)以后每3~ 4周加强免疫一次,方法与要求同步骤(3); (5)注射免疫原后的7~10天耳动脉取血ELISA检测抗体效价,共免疫4~ 5次,效价>10000可取血;常规方法收集纯化血清完成抗体制备。
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