[发明专利]美国白蛾恒温核酸检测试剂盒及其检测方法有效
| 申请号： | 201410271083.8 | 申请日： | 2014-06-18 |
| 公开（公告）号： | CN104099413A | 公开（公告）日： | 2014-10-15 |
| 发明（设计）人： | 詹国辉;郑斯竹;陈景云;葛华林 | 申请（专利权）人： | 苏州市外来有害生物防控技术中心 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 江苏圣典律师事务所 32237 | 代理人： | 贺翔 |
| 地址： | 215121 江苏省苏州*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种美国白蛾核酸的恒温检测试剂盒及其检测方法，该试剂盒组成包括：1）DNA检测装置；2）美国白蛾核酸恒温扩增反应液；3）阳性对照：为含有美国白蛾线粒体COI基因的DNA片段；4）阴性对照：为无菌双蒸水。本发明的检测试剂盒特异性高、灵敏度高；反应速度快，单个样本从样本处理到完成检测，仅需1~1.5小时；可同时满足中通量和低通量的样品检测，特别适合现场检测使用，且整个反应过程只需一个恒温仪器。 | ||
| 搜索关键词： | 美国 恒温 核酸 检测 试剂盒 及其 方法 | ||
【主权项】：
一种美国白蛾核酸的恒温检测试剂盒，其特征在于，组成包括：（1）美国白蛾核酸恒温扩增反应液；（2）DNA检测装置；（3）阳性对照：为含有美国白蛾线粒体COI基因的DNA片段；（4）阴性对照：为无菌双蒸水；其中，美国白蛾核酸恒温扩增反应液的组成为：0.01～0.05μmol正向外围引物；0.01～0.05μmol反向外围引物；0.01～0.05μmol反向交叉引物；0.1～0.5μmol正向探针；0.1～0.5μmol反向探针；3～6mmol MgSO4；0.2～0.4mmol dNTPs溶液；6～10U Gst DNA聚合酶；2μL Betaine（5M）；2μL 10×Thermol buffer；无菌双蒸水补足到18μL；正向外围引物序列为：AGCAGGAACTGGATGAACA；反向外围引物序列为：GTATGGTAATAGCTCCAGC；反向交叉引物序列为：ATTACTACAATCATTAACATACGATTTTCCTACTGCTCATACGAA；正向探针为5’端标记Biotin序列：ATTACTACAATCATTAACATACGATT；反向探针为5’端标记FitC的序列：AATTTATCATTTGATCAAATACCT。
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