[发明专利]禽多杀性巴氏杆菌病菊粉果胶灭活疫苗的制备方法

摘要

禽多杀性巴氏杆菌病菊粉果胶灭活疫苗的制备方法，属于疫苗领域；首先制备禽多杀性巴氏杆菌菌悬液，加入甲醛，加入量为禽多杀性巴氏杆菌菌悬液体积的0.2-0.25%，6-37℃条件下静置20-22小时完成禽多杀性巴氏杆菌菌悬液的灭活；取菊粉加入到灭活后的菌悬液中，加入量与菌悬液的质量比为0.9-1:1；混合均匀后再向其中加入所得混合物体积3%的果胶，混合均匀后室温放置至果胶完全溶解，再向其中加入所得混合物体积0.009-0.01%的硫柳汞，再次混合均匀后即为禽多杀性巴氏杆菌病菊粉果胶灭活疫苗。本发明针对禽类多发性禽多杀性巴氏杆菌病设计，所制备的灭活疫苗对禽类多发性禽多杀性巴氏杆菌病具有较好的免疫预防效果，保护率达到90%以上，安全性好，无不良反应。

主权项

禽多杀性巴氏杆菌病菊粉灭活疫苗的制备方法，其特征在于：具体制备方法包括以下步骤：步骤一、采用接种环取禽多杀性巴氏杆菌菌种划线接种于TSA培养平板上，培养后取单菌落接种于禽多杀性巴氏杆菌液体培养基中，培养获得禽多杀性巴氏杆菌菌悬液；步骤二、向上述步骤一培养所得禽多杀性巴氏杆菌菌悬液中加入甲醛，加入量为禽多杀性巴氏杆菌菌悬液体积的0.2‑0.25%，混合均匀， 36‑37℃条件下静置20‑22小时完成禽多杀性巴氏杆菌菌悬液的灭活；步骤三、禽多杀性巴氏杆菌病菊粉果胶灭活疫苗的制备取菊粉加入到上述灭活后的禽多杀性巴氏杆菌菌悬液中，加入量与禽多杀性巴氏杆菌菌悬液的质量比为0.9‑1:1；混合均匀后再向其中加入所得混合物体积3%的果胶，混合均匀后室温放置至果胶完全溶解，再向其中加入所得混合物体积0.009‑0.01%的硫柳汞，再次混合均匀后即为禽多杀性巴氏杆菌病菊粉果胶灭活疫苗；所述的TSA培养平板的组成成分：按重量百分比TSA培养平板中含有1.5%的胰蛋白胨、0.5%的大豆蛋白胨、0.5%的氯化钠、1.5%的琼脂粉，余量为水；所述的禽多杀性巴氏杆菌液体培养基的组成成分：按重量百分比禽多杀性巴氏杆菌液体培养基中含有1.0‑1.5%的胰蛋白胨、0.3‑0.5%的大豆蛋白胨、0.4‑0.5%的氯化钠，余量为水。