[发明专利]高温胁迫下褐飞虱内参基因的筛选方法及应用有效
| 申请号： | 201410256693.0 | 申请日： | 2014-06-11 |
| 公开（公告）号： | CN104178564A | 公开（公告）日： | 2014-12-03 |
| 发明（设计）人： | 姜建军;杨朗;黄立飞;陈红松;王凤英;黎柳峰;杜晓莉;马琳 | 申请（专利权）人： | 广西壮族自治区农业科学院植物保护研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 广西南宁公平专利事务所有限责任公司 45104 | 代理人： | 杨立华 |
| 地址： | 530007 广西壮族*** | 国省代码： | 广西;45 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种高温胁迫下褐飞虱内参基因的筛选方法，以未受胁迫的褐飞虱为对照材料，不同高温胁迫后的褐飞虱为实验材料进行荧光定量PCR研究；各候选内参基因定量PCR数据输入geNorm和BestKeeper软件进行分析，从而筛选出在高温胁迫和非胁迫下褐飞虱体内最合适、最稳定表达的内参基因——actin1。在此基础上，发明人以高温胁迫后的褐飞虱为样本，以褐飞虱热激蛋白基因hsp90为目的基因，筛选出的actin1基因为内参基因，研究了在高温胁迫下褐飞虱hsp90基因的表达规律。 | ||
| 搜索关键词： | 高温 胁迫 下褐飞虱 内参 基因 筛选 方法 应用 | ||
【主权项】：
一种高温胁迫下褐飞虱内参基因的筛选方法，其特征在于：以25℃饲养的褐飞虱为对照，设置6个高温梯度对褐飞虱成虫进行胁迫处理，处理后立即提取总RNA，反转录合成cDNA，然后以对照和各处理为材料进行实时荧光定量PCR验证，采用geNorm和BestKeeper软件进行数据分析，从而筛选出褐飞虱成虫体内不同高温胁迫和非胁迫下最稳定表达的内参基因。
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