[发明专利]一种荧光蛋白marker的制备和应用无效
| 申请号： | 201410197289.0 | 申请日： | 2014-05-12 |
| 公开（公告）号： | CN103923939A | 公开（公告）日： | 2014-07-16 |
| 发明（设计）人： | 赵巧辉;李桂林;郭立攀;李艳姣;付光宇;吴学炜 | 申请（专利权）人： | 郑州伊美诺生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N15/66;G01N27/447 |
| 代理公司： | 郑州异开专利事务所(普通合伙) 41114 | 代理人： | 王霞 |
| 地址： | 450016 河南省郑州*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种荧光蛋白marker的制备，根据所需蛋白marker的大小选择含带不同融合标签的载体，引物序列视质粒和插入序列的设计而定，长度控制在20bp左右；酶切位点依据不同的质粒及GFP基因片段序列而定；将构建的质粒分别常规转化,按照厂商推荐的方法分别诱导表达不同大小的GFP重组蛋白并纯化，即可得到28KD~80KD的荧光蛋白marker，SDS-PAGE检测蛋白分子量和纯度，常规蛋白定量备用。本发明通过重组构建含GFP开放框和不同大小融合标签表达载体，分别诱导表达、纯化后，根据需要选择不同大小GFP蛋白混合后制备出的绿色荧光proteinmarker，批间重复性完全可以保障，保证了实验的精准性。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 荧光 蛋白 marker 制备 应用 | ||
【主权项】：
一种荧光蛋白marker的制备，其特征在于：包括下述方法：根据所需蛋白marker的大小选择含带不同融合标签的载体，引物序列视质粒和插入序列的设计而定，长度控制在20bp左右；酶切位点依据不同的质粒及GFP基因片段序列而定；将构建的质粒分别常规转化,按照厂商推荐的方法分别诱导表达不同大小的 GFP重组蛋白并纯化，即可得到28KD~80KD的荧光蛋白marker，SDS‑PAGE检测蛋白分子量和纯度，常规蛋白定量备用。
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