[发明专利]预防水貂出血性肺炎的三价灭活疫苗的制备方法

摘要

本发明涉及一种预防水貂出血性肺炎的三价灭活疫苗的制备，其特征在于具体步骤如下：从病貂体内分离获得血清G型绿脓杆菌SD302、血清C型绿脓杆菌SD312、血清I型绿脓杆菌SD403，上述菌种采用冻干保存；将三种血清型绿脓杆菌分别置于含2%胎牛血清的PYG培养基37℃培养后，扩大培养，对菌液进行灭活处理；按照菌体含量将灭活菌液运用生理盐水稀释至浓度为8.0×10⁹CFU/mL；将三种稀释后的灭活菌液与40%铝胶溶液按照1:1:1:1体积比混合，加入终浓度为0.004%硫柳汞，混合得到三价灭活疫苗；其具有安全、多效价性、免疫原性好和特异性好等特点；并且价格适中，适用于基层或临床预防水貂出血性肺炎。

主权项

一种预防水貂出血性肺炎的三价灭活疫苗的制备，其特征在于具体步骤如下：（1）从病貂体内分离获得血清G型绿脓杆菌SD302、血清C型绿脓杆菌SD312、血清I型绿脓杆菌SD403，上述菌种采用冻干保存；（2）将三种血清型绿脓杆菌分别置于含2%胎牛血清的PYG培养基37℃培养后，再以生物反应器扩大培养，利用终浓度为0.2%的甲醛溶液对菌液进行灭活处理；（3）按照菌体含量将灭活菌液运用生理盐水稀释至浓度为8.0×10⁹CFU/mL；（4）将三种稀释后的灭活菌液与40%铝胶溶液按照1:1:1:1体积比混合，加入终浓度为0.004%硫柳汞，混合得到三价灭活疫苗；（5）对灭活疫苗进行物理性状检验、无菌检验、甲醛与硫柳汞残留量检测以及超剂量免疫安全性检验，同时进行灭活疫苗保护率实验，检测疫苗的安全性以及保护效力；疫苗要经过物理性状检测、无菌检验、超剂量免疫安全性检查、效力检查，最终2‑8℃保存；使用时，充分均匀，成年水貂1ml/只肌肉注射活皮下注射，幼龄水貂0.8ml/只皮下注射。