[发明专利]连翘中抗肿瘤活性物质的提取方法及其产品和应用

摘要

本发明公开了一种从连翘中提取抗肿瘤活性物质的方法及其产品和应用。本发明的一种从连翘中提取抗肿瘤活性物质的方法，按如下步骤进行：一、连翘水提液（FS-1）的制备；二、乙醇沉淀法初步分离抗肿瘤有效部位（FS-2）；三、大孔吸附树脂柱层析法分离连翘抗肿瘤有效部位（FS-3）；四、薄层层析法分离连翘中的抗肿瘤活性物质（FS-4）。此外，本发明通过实验证实了连翘抗肿瘤活性物质（FS-4）能够诱导人胃癌SGC-7901细胞的凋亡，同时更进一步的，本发明对连翘抗肿瘤活性物质（FS-4）中的具体成分进行了初步验证。由本发明的方法提取得到的连翘抗肿瘤活性物质（FS-4），具有明显的抗肿瘤活性作用，对于肿瘤疾病的治疗提供了一种新的技术手段。

主权项

一种从连翘中提取抗肿瘤活性物质的方法，其特征在于包括以下步骤：（1）连翘水提液的制备连翘经过筛除尘后，水洗浸泡过夜，次日文火煮沸，过滤，收集滤液，蒸发浓缩，制成水提液，灭菌，标记为FS‑1，置4℃冰箱保存备用；（2）乙醇沉淀法初步分离抗肿瘤有效部位取连翘水提液FS‑1置于塑料离心管中，然后向其中分次缓慢加入质量百分比浓度为90%‑100%的乙醇溶液，并不断震荡，直至乙醇溶液的体积达到溶液总体积的90%‑95%为止，将离心管置于4℃冰箱8‑14h，低温离心，收集上清液，上清液经滤纸过滤，减压浓缩后，置于4℃冰箱备用，标记为FS‑2；（3）大孔吸附树脂柱层析法分离连翘抗肿瘤有效部位取FS‑2，缓慢加入到预处理好的大孔吸附树脂柱顶端，加入量为2%柱体积，待FS‑2渗入树脂层，依次用蒸馏水、质量百分比浓度为30%、60%、90%的乙醇溶液，以5.00ml/min流速进行洗脱，收集洗脱部分，质量百分比浓度为90%的乙醇洗脱液经100℃条件下减压浓缩后，标记为FS‑3；（4）薄层层析法分离连翘抗肿瘤活性物质按照苯：正己烷：甲醇：冰乙酸的体积比=14‑16：14‑16：0.5‑1.5：0.5‑1.5配制展开剂，将FS‑3于室温25℃下在薄层制备板上展开，展开时间50‑60min，晾干；然后，通过碘熏法熏染薄层制备板，并在紫外灯照射下观察，即发现FS‑3分为13个条带，收集从薄层制备板上数的第4个条带，标记为FS‑4，即为抗肿瘤活性物质。