[发明专利]一种三色荧光标记筛选抗阿霉素肾毒性活性物质的方法无效
申请号: | 201410133330.8 | 申请日: | 2014-04-03 |
公开(公告)号: | CN103969232A | 公开(公告)日: | 2014-08-06 |
发明(设计)人: | 程翼宇;赵筱萍;王毅 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64 |
代理公司: | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人: | 胡红娟 |
地址: | 310027 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了一种三色荧光标记筛选抗阿霉素肾毒性活性物质的方法,包括:取肾细胞,加入待筛选物质进行预保护;预保护完成后,加入阿霉素进行损伤;向损伤后的肾细胞中同时加入具有不同激发和发射波长的细胞膜完整性荧光探针、线粒体膜电位荧光探针与细胞核荧光探针,进行荧光标记;染色完成后采集、分析细胞荧光图像,计算待筛选物质对细胞膜、线粒体和细胞核的保护率;从待筛选物质中筛选出对肾细胞的细胞膜、线粒体和细胞核的保护率均大于15%的活性物质。采用三种荧光探针同时标记肾细胞,从不同的作用机制出发考察待筛选物质对肾细胞的保护效果,不仅筛选方法具有快速、经济、高通量、高内涵的特点,而且筛选结果更为全面严谨。 | ||
搜索关键词: | 一种 三色 荧光 标记 筛选 阿霉素 毒性 活性 物质 方法 | ||
【主权项】:
一种三色荧光标记筛选抗阿霉素肾毒性活性物质的方法,包括:(1)取肾细胞,加入待筛选物质进行预保护;(2)预保护完成后,加入阿霉素进行损伤;(3)向损伤后的肾细胞中同时加入具有不同激发和发射波长的细胞膜完整性荧光探针、线粒体膜电位荧光探针与细胞核荧光探针,进行荧光标记;(4)染色完成后采集、分析细胞荧光图像,分别计算待筛选物质对肾细胞细胞膜、线粒体和细胞核的保护率;(5)从待筛选物质中筛选出对肾细胞的细胞膜、线粒体和细胞核的保护率均大于15%的活性物质。
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