[发明专利]一种Oscheius tipulae线虫冻存液及其制备方法及该冻存液的应用

摘要

一种Oscheius tipulae线虫冻存液及其制备方法及该冻存液的应用，本发明涉及冻存液及其制备方法及该冻存液的应用。本发明要解决常规线虫甘油冻存液无法冷冻保种Oscheius tipulae线虫的问题。冻存液由琼脂胶、四氢呋喃和缓冲液组成；制备方法：一、制备缓冲液；二、制备琼脂胶；三、制备冻存液；该冻存液用于Oscheius tipulae线虫的冻存。本发明冻存的Oscheius tipulae线虫解冻复苏后正常生长繁殖，保证了对野外捕获的Oscheius tipulae线虫进行室内培养的可持续性。本发明用于Oscheius tipulae线虫的冻存。

主权项

一种Oscheius tipulae线虫冻存液，其特征在于一种Oscheius tipulae线虫冻存液按体积百分含量由5%～15%的琼脂胶、10%～20%的四氢呋喃和余量为缓冲液组成；其中缓冲液中KH₂PO₄的浓度为0.003g/mL、Na₂HPO₄的浓度为0.006g/mL、NaCl的浓度为0.004g/mL～0.006g/mL、MgSO₄的浓度为0.001g/mL；所述琼脂胶的制备方法如下：a、将KH₂PO₄、Na₂HPO₄、NaCl和MgSO₄加入蒸馏水中，配制成缓冲液，再放入高压蒸汽灭菌锅中，控制温度为120℃，灭菌20min，其中，缓冲液中KH₂PO₄的浓度为0.003g/mL、Na₂HPO₄的浓度为0.006g/mL、NaCl的浓度为0.004g/mL～0.006g/mL、MgSO₄的浓度为0.001g/mL；b、将琼脂加入步骤a制备的缓冲液中，封口膜密封后放入高压蒸汽灭菌锅中，控制温度为120℃，灭菌20min，再室温冷却凝固得琼脂胶，其中，琼脂与缓冲液的质量体积比为（0.02g～0.03g）∶10mL。