[发明专利]pH值依赖的三联吡啶钌重复结晶合成法及其应用

摘要

本发明公开一种pH值依赖的三联吡啶钌重复结晶合成法及其应用。本发明采用逐步降低pH值的结晶方法，使pH值由高到底降低，每降低pH值一个梯度就收集一次结晶，在整个降低过程中，三联吡啶钌结晶会源源不断的出现，直至pH降到最低。采用本发明的方法能大大提高产率，使三联吡啶钌的合成产率从70％左右提高到89%，产率提升约20%左右，产率显著提高。以此为基点，我们将合成的三联吡啶钌应用到核酸检测领域，并验证了其用于核酸检测领域的可行性。本发明的DNA探针性质稳定，便于修饰及储存，操作简单。该方法适用于核酸检测，也可作为免疫分析中抗体标记的方法，以提高灵敏度。

主权项

一种pH值依赖的三联吡啶钌重复结晶合成法，其特征在于包括如下步骤：①称取二氯双(2,2'‑联吡啶)钌、NaHCO₃和4‑羧酸‑2,2'‑联吡啶，混合；②往步骤①得到的混合物中加入甲醇水溶液，得到混合液，混合液在硅油浴下回流，收集溶液；③将步骤②中所得溶液在冰浴中冷却2h；④将pH值调到4.4，形成沉淀；⑤将步骤④中形成的沉淀过滤，收集滤液；⑥往步骤⑤中所得滤液中加入NaPF₆水溶液，搅拌后进行反应；⑦将pH值调到4，冰浴2h，观察结晶形成；⑧抽滤并收集晶体，并保留滤液；将所得晶体进行干燥；⑨取步骤⑧中所得滤液，将pH值调到3，冰浴2h，观察结晶形成；抽滤并收集晶体，并保留滤液；将所得晶体进行干燥；⑩取步骤⑨中所得滤液，将pH值调到2，冰浴2h，观察结晶形成；抽滤并收集晶体，并保留滤液；将所得晶体进行干燥；1○1取步骤⑩中所得滤液，将pH值调到1，冰浴2h，观察结晶形成；抽滤并收集晶体，将所得晶体进行干燥；1○2将步骤⑧至1○1中所得晶体汇总，得到二（2,2'‑联吡啶）（4‑羧酸‑2,2'‑联吡啶）钌的二（六氟磷酸盐）结晶。