[发明专利]一种含有MALAT1启动子序列和报告基因的载体及其构建方法和用途

摘要

本发明涉及一种含有MALAT1启动子序列和报告基因的载体及其构建方法和用途。具体地，将MALAT1的启动子序列（1100bp）插入pGL3‑Basic载体，构建获得含MALAT1启动子和报告基因luc⁺的重组质粒pGL3‑Basic‑MALAT1‑promoter。该重组质粒与海肾萤光素酶报告基因载体pRL‑SV40共转染肿瘤细胞，添加候选抗肿瘤药物作用细胞，然后通过检测双荧光素酶活性可以反映各药物对MALAT1基因启动子转录活性的影响，从而应用于靶向MALAT1基因的抗肿瘤药物筛选。该方法特别适合大规模针对MALAT1基因的抗肿瘤药物的筛选，方法简单，直观和快速，靶向性强，无放射性。

主权项

1.一种含有MALAT1启动子序列和报告基因的载体，其特征在于，所述的载体是在pGL3‑Basic载体的多克隆位点内插入SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列，所述的SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列插入在pGL3‑Basic载体的NheI和BglⅡ酶切位点之间。