[发明专利]一种肽-晚期糖基化终末产物的检测方法有效
| 申请号： | 201410060941.4 | 申请日： | 2014-02-21 |
| 公开（公告）号： | CN103884787A | 公开（公告）日： | 2014-06-25 |
| 发明（设计）人： | 李琳;梁志理;李冰;苏健裕;徐振波;卞华伟;李玉婷 | 申请（专利权）人： | 华南理工大学;中山大学附属第三医院 |
| 主分类号： | G01N30/02 | 分类号： | G01N30/02;G01N30/08 |
| 代理公司： | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人： | 宫爱鹏 |
| 地址： | 510640 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种肽-晚期糖基化终末产物的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）液体样品中二羰基化合物的消除；（2）通过固相萃取技术对样品进行除杂和肽-晚期糖基化终末产物的富集；（3）利用高分辨质谱对富集后的肽-晚期糖基化终末产物定性；（4）利用肽酶对富集后的肽-晚期糖基化终末产物进行酶解，过膜除去肽酶，得到游离态的晚期糖基化终末产物；（5）通过质谱分析对游离态的晚期糖基化终末产物进行定量分析。本发明方法能够高通量检测肽-晚期糖基化终末产物，减少了肽-晚期糖基化终末产物定量检测的复杂性，且具有较好的检出限，目标物的浓度和其信号的峰面积具有良好的线性关系，具有很好的定量效果。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 晚期 糖基化终末 产物 检测 方法 | ||
【主权项】：
一种肽‑晚期糖基化终末产物的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）液体样品中二羰基化合物的消除；（2）通过固相萃取技术对样品进行除杂和肽‐晚期糖基化终末产物的富集，具体步骤：选取官能化聚苯乙烯/二乙烯苯萃取柱，分别使用甲醇和水活化萃取柱，上样，用水淋洗去除杂质，用纯甲醇将肽‐晚期糖基化终末产物洗脱出来；氮吹复溶，最后过膜；（3）利用高分辨质谱对富集后的肽‐晚期糖基化终末产物定性；（4）利用肽酶对富集后的肽‐晚期糖基化终末产物进行酶解，过膜除去肽酶，得到游离态的晚期糖基化终末产物；（5）通过质谱分析对游离态的晚期糖基化终末产物进行定量分析。
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