[发明专利]一种盐解法提取分离玻璃酸酶的方法无效
| 申请号： | 201410024196.8 | 申请日： | 2014-01-20 |
| 公开（公告）号： | CN103789288A | 公开（公告）日： | 2014-05-14 |
| 发明（设计）人： | 李可庆 | 申请（专利权）人： | 江苏集贤绿色化学科技研究院有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/42 | 分类号： | C12N9/42 |
| 代理公司： | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人： | 李纪昌 |
| 地址： | 226000 江苏省*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种盐解法提取分离玻璃酸酶的方法，包括以下步骤：清洗并去除牛睾丸内外皮层，绞碎成糜浆；加入等体积的水，调节pH值至8.0～9.0，按照每1kg糜浆加入5～10mL盐解液的比例，加盐解液搅拌，4～8℃保温2～4小时，过滤取上清液；按每1L过滤液加400g硫酸铵的比例，加入硫酸铵搅拌溶解，静置24小时，过滤，将所得玻璃酸酶粗品溶于水中，调pH值为4.0～7.0，在磷酸盐-柠檬酸缓冲液中透析24小时；除热原；过滤取上清液调节pH值6.5～7.0，冷冻干燥得玻璃酸酶精品。采用盐解的方法能够提高产品效价，生产工序的每一步滤液均能得到回收利用，适用于工业生产。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 解法 提取 分离 玻璃 方法 | ||
【主权项】：
一种盐解法提取分离玻璃酸酶的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一、原料处理；清洗并去除牛睾丸内外皮层，绞碎成糜浆；步骤二、盐解；糜浆中加入等体积的水，用NaOH溶液，调节pH值至8.0～9.0，按照每1kg糜浆加入5～10mL盐解液的比例，加盐解液搅拌，4～8℃保温2～4小时，过滤取上清液，所得固体重复盐解工序一次，收集全部上清液，备用；步骤三、硫酸铵盐析；按每1L上清液加400g硫酸铵的比例，加入硫酸铵搅拌溶解，静置24小时，过滤，上清液重复盐析工序一次，所得固体即玻璃酸酶粗品；步骤四、透析；取玻璃酸酶粗品溶于水中，用HCl溶液，调pH值至4.0～7.0，在磷酸盐‑柠檬酸缓冲液中透析24小时，收集透析液，备用；步骤五、除热原；将透析液4℃离心30～60分钟，转速3000～4000r/min,过滤收集上清液，备用；步骤六、冻干；上清液调节pH值至6.5～7.0，冷冻干燥得玻璃酸酶精品。
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