[发明专利]一种早孕多功能检测试纸的制备方法

摘要

本发明公开了一种早孕多功能检测试纸的制造方法，步骤包括：硝酸纤维素膜的制备；聚酯纤维条的标记及固相；组装及裁切。本发明应用双抗体夹心法及免疫层析法的原理定性检测尿液中人绒毛膜促性腺激素β核心片段和人绒毛膜促性腺激素规则分子，检测步骤较为简单，5分钟内就可以观察到结果，一般使用者可以自己进行检测，检测结果较为精确。本发明通过第一检测线和第二检测线颜色深浅比较，从而判断是否怀孕、是否正常怀孕、及对异位妊娠和先兆流产进行风险评估。

主权项

一种早孕多功能检测试纸的制备方法，其特征在于：所述早孕多功能检测试纸包括塑料基片（1），所述塑料基片（1）上设有上样垫（2）和吸水垫（3），所述上样垫（2）和所述吸水垫（3）上均设有保护膜（4），所述上样垫（2）和所述吸水垫（3）之间下方设有硝酸纤维素膜（5），所述上样垫（2）的连接端设有固相化胶体金（6），所述固相化胶体金（6）的一端与所述硝酸纤维素膜（5）的一端搭接在一起，所述硝酸纤维素膜（5）上依次包被有第二检测线（T₂）、第一检测线（T₁）和质控线（C）；所述早孕多功能检测试纸的制备方法包括以下步骤：A、硝酸纤维素膜的制备：a、选择3um～10um孔径的硝酸纤维素膜，根据需要将膜分切成宽度为大于等于2.0cm,长度为30.5cm的规格备；b、用0.1MTris‑Hcl缓冲液配制供第一检测线包被使用的抗人绒毛膜促性腺激素β核心片段抗体0.35mg/ml、供第二检测线包被使用的抗人绒毛膜促性腺激素α‑HCG抗体1.8mg/ml及供质控线包被使用的抗鼠IgG抗体1.2mg/ml；     c、选择硝酸纤维素膜的抗体包被面并作标记，将需包被的第一检测线、第二检测线和质控线平行均匀的包被在膜片上，且第一检测线与第二检测线距离0.4cm、第二检测线与质控线的间距控制在距离0.8cm，硝酸纤维素膜在4℃～35℃的恒温条件下干燥备用；     d、配置封闭处理浸泡液，向配液罐加入实际生产量的纯化水；用电子分析天平称量0.1Mol缓冲液、0.5%糖份、1%封闭蛋白、0.05％防腐剂，直接加入到配液罐中搅拌，搅拌直至完全溶解，加纯化水定容至所需体积，充分搅拌均匀，搅拌时间不少于10分钟，备用；     e、将硝酸纤维素膜用0.01Mol磷酸盐浸泡洗涤后，浸泡于封闭处理液中30min，取出晾干备用；B、聚酯纤维条的标记及固相：a、胶体金复溶液的配制：向配液罐加入实际生产量的纯化水；用电子分析天平称量5%海藻糖、2%牛血清白蛋白、0.5%柠檬酸三钠、0.05%聚乙二醇、0.05％NaN3，直接加入到配液罐中搅拌，搅拌直至完全溶解，加纯化水定容至所需体积，充分搅拌均匀，搅拌时间不少于30分钟，备用；b、用量筒量取需要标记量的胶体金，按PH6.5‑7.0进行调节，即加入0.35% 0.2mol/L的碳酸钾溶液，于磁力搅拌器上搅拌15分钟后，取HCG‑β单克隆抗体按11ug/ml标记胶体金体积5%的双蒸水中稀释并混合均匀，加入胶体金中，于磁力搅拌器上搅拌30分钟后加入0.5‰稳定剂后搅拌30分钟后离心，收集沉淀，用胶体金复溶液按3%复溶，于磁力搅拌器上搅拌至混合均匀，备用；c、取上述3%复溶的胶体金，用胶体金复溶液按4%复溶，于磁力搅拌器上混合均匀；将混合均匀的胶体金溶液用喷金机按照3.5ul/cm的线浓度喷于胶体金吸附垫上，置于干燥室晾干≥4个小时，干燥室控制温度18‑28℃，相对湿度≤40%，保证空气畅通且气流不能直接吹于聚酯纤维条上，将干燥好的标记金放入到装有干燥剂的铝箔袋中，密封保存，备用；C、组装及裁切：a、取已粘贴硝酸纤维素膜的透明基片半成品，将固相了的聚酯纤维条粘贴在透明基片上，并保持与硝酸纤维素膜呈搭接约1mm，将吸水纸复合在硝酸纤维素膜的透明基片膜上端并与膜搭接约1mm，将吸样载体复合在固相了的聚酯纤维条下端并与其搭接约1mm，备用；b、根据相应的反应装置，将已组装备用的基片，切割成条状试纸，备用。