[发明专利]一种基于微流控芯片和核酸适配体识别技术的腺苷检测方法

摘要

本发明公开了一种基于微流控芯片和核酸适配体识别技术的腺苷检测方法，生物素修饰的腺苷核酸适配体和生物素修饰的酪蛋白通过生物素-亲合素结合方法固定于亲合素修饰微球的表面形成功能化微球；将辣根过氧化物酶和巯基修饰的捕获探针修饰到纳米颗粒上作为信号标记；将功能化纳米颗粒流入微流控微珠阵列检测芯片的检测区与微珠阵列杂交，洗脱后流入腺苷溶液与杂交微球孵育；流入过氧化物酶底物溶液，将生物素化的酪胺结合到微球表面的酪蛋白上，洗脱后流入亲合素标记的量子点；通过计算流入腺苷后微球表面荧光与未流入腺苷微球表面荧光的比值对腺苷进行定性和定量。本发明可高灵敏检测分析目标，实现了血清样品中腺苷的特异及准确的定量分析。

主权项

一种基于微流控芯片和核酸适配体识别技术的腺苷检测方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)生物素修饰的腺苷核酸适配体和生物素修饰的酪蛋白通过生物素‑亲合素结合方法固定于亲合素修饰微球的表面形成功能化微球，所述微球固定在微流控芯片检测区的相应微型小室中，形成微流控微珠阵列检测芯片；(2)将辣根过氧化物酶和巯基修饰的捕获探针修饰到纳米颗粒上作为信号标记；(3)将步骤(2)形成的功能化纳米颗粒流入微流控微珠阵列检测芯片的检测区与微珠阵列杂交，洗脱后流入腺苷溶液与杂交微球孵育；(4)流入过氧化物酶底物溶液，通过多酶纳米信号放大技术将生物素化的酪胺结合到微球表面的酪蛋白上，洗脱后流入亲合素标记的量子点，所述量子点能与微球表面酪蛋白上结合的生物素识别并固定；(5)通过计算流入腺苷后微球表面荧光与未流入腺苷微球表面荧光的比值对腺苷进行定性和定量。