[发明专利]用于检测乙型肝炎病毒YVDD耐药突变的分子倒置探针及其应用有效
| 申请号： | 201310692241.2 | 申请日： | 2013-12-17 |
| 公开（公告）号： | CN103642944A | 公开（公告）日： | 2014-03-19 |
| 发明（设计）人： | 陈鸣;唱凯;皮燕;邓少丽;鲁卫平;王丰;贾双荣;李发科 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军第三军医大学第三附属医院 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11;C12R1/93 |
| 代理公司： | 北京元本知识产权代理事务所 11308 | 代理人： | 黎昌莉 |
| 地址： | 400042 重*** | 国省代码： | 重庆;85 |
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| 摘要： | 本发明属于核酸分子检测领域，涉及用于检测乙型肝炎病毒YVDD耐药突变的分子倒置探针技术，分子倒置探针的核苷酸序列如SEQ ID NO:8所示；其运用方法为：设计PCR扩增引物，建立分子倒置探针的单碱基延伸体系，用于分子倒置探针与靶序列的退火互补及单碱基延伸；建立分子倒置探针的连接体系，用于分子倒置探针的连接反应；建立外切酶消化体系，用于消化未环化的分子倒置探针；建立UNG酶消化体系，用于将环化的分子倒置探针消化为单链；建立PCR扩增反应体系，用于以单链化的分子倒置探针为模板的PCR扩增反应；检测扩增产物。该方法具有较高的灵敏度、特异度和准确度，并且操作简单，无需昂贵的检测仪器，适合临床推广。 | ||
| 搜索关键词： | 用于 检测 乙型肝炎 病毒 yvdd 耐药 突变 分子 倒置 探针 及其 应用 | ||
【主权项】：
分子倒置探针，其特征在于，由以下部分组成：1）如SEQ ID NO:1所示的目的基因互补序列A和如SEQ ID NO:2所示的目的基因互补序列B;2)UNG酶识别位点“‑TTUUUTT‑”；3）正向引物的识别序列A和反向引物的识别序列B，所述识别序列A如SEQ ID NO:3所示，所述识别序列B如SEQ ID NO:4所示；4）如SEQ ID NO:5所示的连接序列。
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