[发明专利]快速测定蛋白混合物中的各组分含量的毛细管等电聚焦方法有效
申请号: | 201310624166.6 | 申请日: | 2013-11-28 |
公开(公告)号: | CN104764787A | 公开(公告)日: | 2015-07-08 |
发明(设计)人: | 郭建平;黄哲;任文霞;赵国凤;孟斐;阙红;周伟昌;陈智胜 | 申请(专利权)人: | 无锡药明康德生物技术有限公司;上海药明康德新药开发有限公司;苏州药明康德新药开发股份有限公司 |
主分类号: | G01N27/447 | 分类号: | G01N27/447 |
代理公司: | 上海浦一知识产权代理有限公司 31211 | 代理人: | 高月红 |
地址: | 214092 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种快速测定蛋白混合物中的各组分含量的毛细管等电聚焦方法,包括:1)将两性载体、添加剂、等电点标记物与待分析的蛋白混合物样品进行混合,形成混合液;2)将混合液上样于毛细管柱,聚焦并检测,得到等电聚焦谱图;3)将步骤2)的等电聚焦谱图与待分析的蛋白混合物样品中的单蛋白组分等电聚焦谱图进行比对,确定步骤2)的等电聚焦谱图中不同等电点范围对应的单蛋白组分;4)根据步骤3)的比对结果和步骤2)的等电聚焦谱图信息,确定待分析的蛋白混合物样品中的各组分含量。本发明具有通用性强、分析周期短、数据处理简单等优点,而且适用于蛋白混合物的生产工艺开发和质量控制。 | ||
搜索关键词: | 快速 测定 蛋白 混合物 中的 各组 含量 毛细管 聚焦 方法 | ||
【主权项】:
一种测定蛋白混合物中的各组分含量的毛细管等电聚焦方法,其特征在于,包括步骤:1)将两性载体、添加剂、等电点标记物与待分析的蛋白混合物样品进行混合,形成混合液;其中,添加剂包括:甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、尿素、甘油、蔗糖中的一种或多种;2)将步骤1)的混合液上样于毛细管柱,在10~40℃、0.1~1kV/cm下聚焦2~15min,并通过毛细管等电聚焦仪或毛细管电泳仪检测,得到等电聚焦谱图;3)将步骤2)的等电聚焦谱图与待分析的蛋白混合物样品中的单蛋白组分等电聚焦谱图进行比对,确定步骤2)的等电聚焦谱图中不同等电点范围对应的单蛋白组分;4)根据步骤3)的比对结果和步骤2)的等电聚焦谱图信息,确定待分析的蛋白混合物样品中的各组分含量。
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