[发明专利]地衣芽胞杆菌表达宿主有效
申请号: | 201310562150.7 | 申请日: | 2013-11-12 |
公开(公告)号: | CN104630123B | 公开(公告)日: | 2018-09-14 |
发明(设计)人: | 陈守文;周银华;魏雪团;陈敬帮;祁高富;冀志霞 | 申请(专利权)人: | 华中农业大学 |
主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12N9/26;C12N9/20;C12N9/50;C12N15/75;C12R1/10 |
代理公司: | 武汉宇晨专利事务所 42001 | 代理人: | 王敏锋 |
地址: | 430070 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明公开了一种多基因缺失的地衣芽胞杆菌宿主菌BL10,保藏编号为CCTCCNO:M2013400。该宿主菌来源于地衣芽胞杆菌WX‑02,部分或完全缺失了10个基因。这10个基因分别是8个蛋白酶基因(mpr,编码胞外金属蛋白酶;vpr,编码丝氨酸蛋白酶;aprX,胞内丝氨酸蛋白酶;epr,编码微小胞外蛋白酶;bpr,编码芽胞杆菌肽酶F;wprA,编码与细胞壁结合的蛋白酶;aprE,编码胞外碱性丝氨酸蛋白酶;bprA,编码芽胞杆菌肽酶F)和2个胞外分泌蛋白基因(hag,编码鞭毛蛋白;amyL,编码α‑淀粉酶)。BL10完全无胞外蛋白酶活性,可降低蛋白酶对目标蛋白的降解作用。当利用该表达宿主表达目标蛋白时,表达量更高,该宿主菌有利于增强蛋白的表达。 | ||
搜索关键词: | 地衣 杆菌 表达 宿主 | ||
【主权项】:
1.一种利用地衣芽孢杆菌表达目标蛋白的方法,其中所述目标蛋白是淀粉酶、脂肪酶和蛋白酶;所述的地衣芽孢杆菌为地衣芽孢杆菌BL10,保藏编号为CCTCC NO:M2013400;所述的方法中,是选择枯草芽孢杆菌强启动子P43与目标蛋白基因连接,插入到pHY300PLK空质粒中,构建分泌表达载体,电转化至地衣芽孢杆菌BL10表达宿主,获得工程菌。
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