[发明专利]一种木瓜蛋白酶的提纯方法

摘要

本发明公开了一种木瓜蛋白酶的提纯方法,包括如下步骤：1）往木瓜浆中加入水，得到木瓜浆溶液;2）添加复合酶Extyme-A;3）板框过滤：将经过步骤2）处理后的木瓜浆溶液进行板框过滤；4）离心：滤液进行沉降离心，收集离心液；5）添加复合酶Extyme-B;6）粗滤:将离心液采用聚偏氟乙烯滤膜进行过滤；7）精滤:将粗滤后的料液采用聚砜超滤膜进行过滤浓缩得到木瓜蛋白酶浓缩液；8）真空干燥，得到木瓜蛋白酶。本发明能够明显改善过滤效果，使得粗滤和超滤变得流畅，缩短过滤时间，提高工作效率和提高酶活收率。

主权项

一种木瓜蛋白酶的提纯方法, 其特征在于包括如下步骤：1）往木瓜浆中加入水，搅拌均匀，得到木瓜浆溶液，然后调节木瓜浆溶液的pH值为6‑7;2）添加复合酶Extyme‑A：按木瓜浆重量的0.2‑0.6%添加复合酶Extyme‑A到木瓜浆溶液中，搅拌反应5小时；所述复合酶Extyme‑A由按酶活力计的以下原料混合制备而成：果胶酶8000U/g、α‑淀粉酶2000U/g、β‑葡聚糖酶25000U/g;3）板框过滤：将经过步骤2）处理后的木瓜浆溶液进行板框过滤，过滤压力控制在0.6‑0.8MPa，收集滤液； 4）离心：将步骤3）收集到的滤液进行沉降离心，收集离心液；5）添加复合酶Extyme‑B：按离心液重量的0.1%‑0.2%添加复合酶Extyme‑B到离心液中;搅拌至酶完全溶解，混合均匀;所述复合酶Extyme‑B由按酶活力计的以下原料混合制备而成：碱性蛋白酶50000U/g、果胶酶6000U/g;6）粗滤: 将经过步骤5）处理后的离心液采用聚偏氟乙烯滤膜进行过滤，聚偏氟乙烯滤膜的孔径为0.22um，操作压力0.1MPa； 7）精滤: 将经过步骤6）粗滤后的料液采用聚砜超滤膜进行过滤浓缩，聚砜超滤膜的截留分子量为10K，操作压力0.1MPa；得到木瓜蛋白酶浓缩液； 8）真空干燥：将步骤7）得到的木瓜蛋白酶浓缩液进行抽真空干燥，得到木瓜蛋白酶。