[发明专利]一种微生物发酵法生产1;3-丙二醇的方法

摘要

本发明公开了一种微生物发酵法生产1,3‑丙二醇的方法，包括如下内容：菌种经种子活化、种子培养得到种子培养液，种子培养液在发酵培养基中，以甘油为发酵底物，进行厌氧或微氧发酵，发酵期间通过补料方式维持发酵底物浓度，发酵结束后，分离回收1,3‑丙二醇产品。该方法可以强化菌体消耗能量、产生还原力的菌体生成途径，有效的促进菌体生长，并增强菌体细胞膜的通透性，提高菌体对甘油的利用率，在1,3‑丙二醇的合成领域有着广阔的应用前景。

主权项

1.一种微生物发酵法生产1,3‑丙二醇的方法，其特征在于包括如下内容：采用克雷伯氏肺炎杆菌、弗氏柠檬菌或丁酸梭状芽孢杆菌中的一种作为菌种，经种子活化、种子培养得到种子培养液，菌种活化的培养温度为30～40℃，搅拌转速为200～500rpm，培养时间为8～12小时；菌种培养的培养温度为30～40℃，搅拌转速为200～500rpm，培养时间为8～12小时；种子培养液在发酵培养基中，以甘油为发酵底物，进行厌氧或微氧发酵，发酵培养的培养温度为30～40℃，搅拌转速为200～500rpm，发酵培养时间36～72h；所述的厌氧发酵条件为：氮气通入量为2～4vvm；微氧发酵条件为：空气通入量为0.25～0.5vvm；发酵期间通过补料方式维持发酵底物浓度，发酵结束后，分离回收1,3‑丙二醇产品；其中在配制发酵培养基过程和/或发酵过程中加入钙类助剂；所述的钙类助剂，选自果糖酸钙和/或葡萄糖酸钙，发酵体系中钙类助剂的浓度为1~100g/L；其中，种子活化培养基各组分含量如下：蛋白胨 7～15g/L，酵母膏 3～10g/L，NaCl 7～15g/L；种子培养基各组分含量如下：酵母膏 7～15g/L，麦芽糖 1～5g/L，蛋白胨 3～10g/L，NaCl 3～10g/L；发酵培养基各组分含量如下：酵母膏 3～10g/L，K₂HPO₄·3H₂O 3～10g/L，KH₂PO₄ 1～5g/L，NH₄Cl 1～5g/L，NaCl 0.1～2g/L，MgSO₄·7H₂O 0.1～2g/L，FeCl₃·6H₂O 5～100mg/L，CoCl₂·6H₂O 5～100mg/L，维生素B₁₂ 5～100mg/L，甘油 10～80g/L。