[发明专利]一种朱顶红标准化离体培养种苗的方法

摘要

本发明提供一种朱顶红标准化离体培养种苗的方法，将朱顶红杂交株系的小鳞茎经消毒灭菌，再纵剖成块接种于不定芽培养基中进行诱导培养至生成不定芽，然后将不定芽切块后，置于增殖苗培养基中进行继代培养得到增殖苗，再将增殖苗切分成单株后，置于生根苗培养基中进行生根培养，得到生根苗，最后生根苗经驯化后定植得到移栽苗，成活率达95%以上。本发明解决了朱顶红繁殖效率低无法实现工厂化生产的问题，并高效诱导出朱顶红不定芽，筛选出繁殖系数达3的培养基配方，摸索出不同培养阶段的切苗方法，缩短了朱顶红繁殖的周期。

主权项

一种朱顶红标准化离体培养种苗的方法，其特征在于经过下列各步骤：（1）将朱顶红杂交株系的小鳞茎依次在质量浓度为75‑80%的酒精中消毒灭菌20～40秒、质量浓度为0.1‑0.15%的氯化汞溶液中消毒灭菌10～20分钟、、质量浓度为2‑3%的次氯酸钠溶液中消毒灭菌5～10分钟，然后用无菌水漂洗3次；（2）将步骤（1）消毒后的小鳞茎在无菌工作环境中纵剖成块后，再接种于下列培养基中：MS培养基+2.0～5.0mg/L的ZT+0.1～0.3mg/L 的NAA+100～300mg/L 的活性炭+30～40g/L的糖+6g/L的琼脂，控制pH为5.6～5.8，并在温度为22～26℃、光照强度为1500～2200Lx、光照时间为12～16h/天的条件下，进行诱导培养至生成不定芽；（3）将步骤（2）所得不定芽在无菌工作环境中切块后，置于下列培养基中：MS培养基+3.0～5.0mg/L的ZT+0.1～0.5mg/L的NAA +100～300mg/L的活性炭+20～60mg/L的硫酸腺嘌呤+30～40g/L的糖+6g/L的琼脂，控制pH为5.6～5.8，并在温度为22～26℃、光照强度为1500～2200Lx、光照时间为12～16h/天的条件下，进行继代培养，每30天继代一次，每次继代更换一次上述培养基，并对不定芽进行纵剖，继代培养直至得到增殖苗；（4）将步骤（3）所得增殖苗切分成单株后，置于下列培养基中：MS培养基+0.3～0.5mg/L的IBA+0.3～0.5mg/L的NAA+100～300mg/L的 活性炭+30～40g/L的糖+6g/L的琼脂，控制pH为5.6～5.8，并在温度为22～26℃、光照强度为1500～2200Lx、光照时间为12～16h/天的条件下，进行生根培养20～30天，得到生根苗；（5）将步骤（4）所得生根苗置于塑料大棚苗床上，于自然光照下驯化15～20天，再将生根苗洗净后，置于质量浓度为0.1‑0.2%的甲基托布津中浸泡1min，然后置于下列基质中定植：腐殖土:珍珠岩的体积比=3:1，待30～40天后得到移栽苗。