[发明专利]美人蕉黄斑驳病毒巢式PCR检测试剂盒及其检测方法有效
| 申请号： | 201310432439.7 | 申请日： | 2013-09-22 |
| 公开（公告）号： | CN103571969A | 公开（公告）日： | 2014-02-12 |
| 发明（设计）人： | 沈建国;虞赟;蔡伟;陈智明;张永江;闫诚 | 申请（专利权）人： | 福建出入境检验检疫局检验检疫技术中心 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 福州智理专利代理有限公司 35208 | 代理人： | 丁秀丽 |
| 地址： | 350001 福建*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种美人蕉黄斑驳病毒巢式PCR检测试剂盒及其检测方法，专用于美人蕉黄斑驳病毒的检测。该试剂盒包括：外侧上游引物、外侧下游引物、内侧上游引物、内侧下游引物、PCR Buffer、dNTPs、Mgcl2、Taq DNA聚合酶、阳性对照、阴性对照和ddH2O。本发明根据美人蕉黄斑驳病毒基因序列设计2对特异性引物，以提取的DNA为模板进行第一轮PCR扩增，再以第一轮PCR产物为模板进行第二轮PCR扩增，扩增产物通过琼脂糖凝胶电泳检测，如果出现大小为352bp的特异性目的片段，则判定检测的病毒为美人蕉黄斑驳病毒。本发明利用巢式PCR技术对美人蕉黄斑驳病毒进行检测，具有特异性强、灵敏度高、检测用时短的优点，能够满足进出境口岸检疫及农业生产的需要。 | ||
| 搜索关键词： | 美人蕉 斑驳 病毒 pcr 检测 试剂盒 及其 方法 | ||
【主权项】：
一种美人蕉黄斑驳病毒巢式PCR检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：1）外侧上游引物：10μmol/L，引物序列为5’‑TAGGGCAGTCAAGGATTAAGC‑3’；2）外侧下游引物：10μmol/L，引物序列为5’‑CAATCTTGGCGTAGAACGAG‑3’；3）内侧上游引物：10μmol/L，引物序列为5’‑ACTGCGTCAGTTTCTCGG‑3’；4）内侧下游引物：10μmol/L，引物序列为5’‑GGCCTGGATCTCAGCATCTA‑3’；5）PCR Buffer：10×；6）dNTPs：10mmol/L；7）Mgcl2：25mmol/L；8）Taq DNA聚合酶：2.5U/μL；9）美人蕉黄斑驳病毒的阳性对照样品；10）不含美人蕉黄斑驳病毒的阴性对照样品；11）ddH2O。
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