[发明专利]检测PRRSV的多重荧光定量RT-PCR方法及其应用有效
| 申请号： | 201310424225.5 | 申请日： | 2013-09-17 |
| 公开（公告）号： | CN103725793A | 公开（公告）日： | 2014-04-16 |
| 发明（设计）人： | 施开创;莫胜兰;胡杰;邹联斌;张步娴;屈素洁;陆文俊;粟艳琼;苏凯;李军 | 申请（专利权）人： | 广西壮族自治区动物疫病预防控制中心 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/68;G01N21/64 |
| 代理公司： | 广西南宁汇博专利代理有限公司 45114 | 代理人： | 朱萍球 |
| 地址： | 530001 广西壮族*** | 国省代码： | 广西;45 |
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| 摘要： | 本发明公开了检测PRRSV多重荧光定量RT-PCR方法及其应用。检测PRRSV荧光定量RT-PCR引物和探针，引物包括AM-PRRSV引物对和TJM-PRRSV引物对，探针包括AM-V-PRRSV-P探针、AM-C-PRRSV-P探针、TJM-PRRSV-P探针；检测PRRSV多重荧光定量RT-PCR方法，利用引物和探针进行荧光定量RT-PCR扩增，扩增后收集荧光信号，出现扩增曲线者为阳性，其特征在于，所述RT-PCR扩增体系包括上述引物和探针。本发明可同时检测并区分PRRSV美洲型经典毒株、HP-PRRSV及高致病性PRRS活疫苗TJM-F92株，具有特异性强、敏感性高、自动化程度高优点。 | ||
| 搜索关键词： | 检测 prrsv 多重 荧光 定量 rt pcr 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
一种检测PRRSV的多重荧光定量RT‑PCR方法, 该方法利用AM‑PRRSV引物对、TJM‑PRRSV引物对、AM‑V‑PRRSV‑P探针、AM‑C‑PRRSV‑P探针、TJM‑PRRSV‑P探针对阳性对照样品、检测样品进行荧光定量RT‑PCR扩增，扩增后收集荧光信号，其特征在于，所述的TJM‑PRRSV引物对其上游引物核苷酸序列为5'‑ CAACCCTGCACCTGTGTCAT ‑3'，下游引物核苷酸序列为5'‑ TTCTCCCTTGGAGGGTGCC ‑3'；所述的TJM‑PRRSV‑P探针为5'‑F‑ AGCTCCCTGGGTTCAGTGGCC ‑Q‑3'，其中F为报告荧光基团，Q为淬灭荧光基团。
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