[发明专利]一种酿酒酵母工程菌生产β-香树脂醇的方法

摘要

本发明提供了一种酿酒酵母工程菌生产β-香树脂醇的方法，属于生物化工领域。本发明从白色念珠菌中克隆2,3-氧化鲨烯单氧酶基因，化学合成经密码子优化的光果甘草β-香树脂醇合酶基因，利用酿酒酵母组成型启动子构建基因表达盒，与双酶切后的质粒共同转化酿酒酵母，通过酿酒酵母的同源重组功能实现基因表达盒与质粒的组装，从而强化了2,3-氧化鲨烯单氧酶并导入了β-香树脂醇合酶。本发明的酿酒酵母工程菌代谢葡萄糖直接合成β-香树脂醇，β-香树脂醇的合成与酿酒酵母生长耦合，实现了植物次生代谢产物β-香树脂醇的酿酒酵母人工合成，该方法不需要效应剂诱导、工艺简单，可用于发酵生产β-香树脂醇。

主权项

一种酿酒酵母工程菌的构建，其特征在于，从白色念珠菌CGMCC2.2086中克隆2,3‑氧化鲨烯单氧酶SQE基因，密码子优化光果甘草中的β‑香树脂醇合酶bAS基因并化学合成，从酿酒酵母INVSc1中克隆组成型启动子TYS1p、FBA1p和终止子TYS1t、FBA1t，然后构建2,3‑氧化鲨烯单氧酶基因表达盒TYS1p‑SQE‑TYS1t和β‑香树脂醇合酶基因表达盒FBA1p‑bAS‑FBA1t，与双酶切后的pRS41H质粒共同转入酿酒酵母INVSc1中，利用酿酒酵母的同源重组功能实现两个基因表达盒和质粒的组装连接。