[发明专利]孔雀石绿残留一步式化学发光酶免疫分析检测法及试剂盒

摘要

本发明公开了一种孔雀石绿残留一步式化学发光酶免疫分析检测法及试剂盒，该法结合了间接酶免疫反应和化学发光技术，在不需要另外制备酶标单克隆抗体的情况下，将传统两步式化学发光酶免疫分析法简化为一步，并利用15～35%乙腈对高浓度无色孔雀石绿溶解力有限的特性，将其作为样品溶解液。该法应用在动物源性食品中孔雀石绿残留检测，具有快速、简便、特异、灵敏、准确、检测范围宽等特点，更加符合快速检测的要求，具有较好的应用前景。本发明试剂盒的IC50为0.45μg/L，回收率为86.37～116.84%，与标准检测方法的吻合率为100%，适合用于孔雀石绿的痕量分析与批量检测。

主权项

一种孔雀石绿残留一步式化学发光酶免疫分析检测法，其特征在于包括以下步骤：<1>处理待测样品；<2>将半抗原无色孔雀石绿与载体蛋白卵清蛋白的偶联物作为抗原包被于发光固相载体，封闭后，依次加入系列标准样品或经前处理的待测样品、酶标二抗HRP‑山羊抗小鼠IgG和无色孔雀石绿单克隆抗体进行反应，然后再加入化学发光液，测定系列标准样品和待测样品的发光值；<3>以步骤<2>测得的发光值计算抑制率，绘制标准曲线，并根据标准曲线的回归方程和待测样品的抑制率计算待测样品中孔雀石绿的含量。