[发明专利]一种检测SOCS家族基因标签单核甘酸多态性位点的方法及试剂盒有效

专利信息
申请号: 201310376421.X 申请日: 2013-08-26
公开(公告)号: CN103397103A 公开(公告)日: 2013-11-20
发明(设计)人: 张安强;蒋建新;顾玮;岳彩黎;王海燕;杜鹃 申请(专利权)人: 中国人民解放军第三军医大学第三附属医院
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68
代理公司: 北京元本知识产权代理事务所 11308 代理人: 周维锋
地址: 400042 *** 国省代码: 重庆;85
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摘要: 发明属于分子生物学领域,具体涉及适用于单、双重PCR结合焦磷酸测序技术检测SOCS家族基因标签单核甘酸多态性位点的试剂盒及方法,所述方法具体为:根据被证实的SOCS家族基因标签单核甘酸多态性位点,设计特异性扩增引物和测序引物,其中,所述特异性扩增引物中的一条用生物素标记;以待测标本的DNA为模板,用特异性扩增引物进行PCR反应,得PCR扩增物;将所得PCR扩增物采用碱变性分开成单链,取其中生物素标记单链PCR扩增产物纯化后,与所述测序引物进行杂交反应,并分析结果;本发明所选取的SOCS靶序列,以及应用本发明的试剂盒能够实现快速、简便、准确、高效、实用、经济的检测SOCS标签单核甘酸多态性基因型,能够满足临床检验实际工作的需要,利于SOCS基因检测预测疾病的发生、发展风险。
搜索关键词: 一种 检测 socs 家族 基因 标签 单核 多态性 方法 试剂盒
【主权项】:
一种检测SOCS家族基因标签单核甘酸多态性位点的方法,其特征在于,具体包括以下步骤:1)特异性引物的设计根据被证实的SOCS家族基因标签单核甘酸多态性位点,设计特异性扩增引物和测序引物,其中,所述特异性扩增引物中的一条用生物素标记;2)PCR扩增以待测标本的DNA为模板,用步骤1)所述的特异性扩增引物进行PCR反应,得PCR扩增物;3)焦磷酸测序将步骤2)所得PCR扩增物采用碱变性使其分开成单链,取其中被生物素标记的单链PCR扩增产物纯化后,与步骤1)所述测序引物进行杂交反应,并分析结果以判断所述待测标本的CIS、SOCS2、SOCS3、SOCS4、SOCS5、SOCS6和SOCS7靶位点是否具备多态性。
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