[发明专利]通过加强辅酶循环再生速率提高Bacillus amyloliquefaciens 2,3-丁二醇产量有效
申请号: | 201310342415.2 | 申请日: | 2013-08-08 |
公开(公告)号: | CN103602624A | 公开(公告)日: | 2014-02-26 |
发明(设计)人: | 饶志明;杨套伟;张显;徐美娟;满在伟 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12N15/75;C12P7/18;C12R1/07 |
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地址: | 214122 江苏省*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明从B.amyloliqefaciens B10-127中克隆出参与2,3-丁二醇合成途径中辅酶循环再生的关键酶基因3-磷酸甘油醛脱氢酶(gapdh)和3-羟基-2-丁酮还原酶(acr),并将该基因与穿梭表达质粒pMA5-HpaII连接,成功构建了携带基因gapdh和acr基因的穿梭表达质粒pMA5-HpaII-acr-HapII-gapdh,并转入解淀粉芽孢杆菌B10-127中,获得加强gapdh和acr基因表达的解淀粉芽孢杆菌pMA5-HpaII-acr-HapII-gapdh/B.amyloliquefaciens。原始菌株相比,重组菌2,3-丁二醇产量提高了14.7%,副产物如3-羟基-2-丁酮、乳酸和丁二酸的积累分别降低65.6%、43.8%和42.4%,且发酵周期有所缩短。通过补料流加发酵,2,3-丁二醇产量达到121.3g/L。 | ||
搜索关键词: | 通过 加强 辅酶 循环 再生 速率 提高 bacillus amyloliquefaciens | ||
【主权项】:
一种加强辅酶循环再生速率的重组解淀粉芽孢杆菌(B.amyloliquefaciens),其特征在于:将SEQ ID NO:1所示的3‑羟基‑2‑丁酮还原酶基因acr和SEQ ID NO:2所示的3‑磷酸甘油醛脱羧酶基因gapdh共同克隆到穿梭载体pMA5‑HpaII构建成为重组穿梭表达质粒pMA5‑HpaII‑acr‑HapII‑gapdh并转化至保藏编号为CCTCC NO:M2012349的解淀粉芽孢杆菌中,从而提高解淀粉芽孢杆菌合成2,3‑丁二醇的能力。
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