[发明专利]酸性橙Ⅱ人工抗原合成及酸性橙Ⅱ-IgY抗体制备方法有效
| 申请号： | 201310341658.4 | 申请日： | 2013-08-07 |
| 公开（公告）号： | CN103360489A | 公开（公告）日： | 2013-10-23 |
| 发明（设计）人： | 张小莺;何金鑫;杨文静 | 申请（专利权）人： | 西北农林科技大学 |
| 主分类号： | C07K14/765 | 分类号： | C07K14/765;C07K14/77;C07K1/107;C07K16/44;C07K16/02 |
| 代理公司： | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人： | 汤东凤 |
| 地址： | 712100 *** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种酸性橙Ⅱ人工抗原合成的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：（1）称取酸性橙Ⅱ，加入丙酮溶解，再加入丁二酸酐、无水吡啶，加热回流24h；（2）旋蒸除去丙酮，干燥后可见蒸馏烧瓶底部一层橙色，加DMF溶解，再加入NHS、DCC，室温下在磁力搅拌器上搅拌，获得反应液，离心，去沉淀，制成酸性橙Ⅱ活化中间产物；（3）称取BSA或OVA，溶于PBS中，在磁力搅拌器上边搅拌边将酸性橙Ⅱ活化中间产物逐滴加入到BSA-PBS或OVA-PBS溶液中，搅拌过夜；（4）次日将搅拌过夜的反应液置于透析袋中，在冰箱内以PBS中透析72h，每8h换透析液一次；（5）透析结束后，将透析袋内液体离心，去沉淀，即得酸性橙Ⅱ人工抗原。 | ||
| 搜索关键词： | 酸性 人工 抗原 合成 igy 抗体 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种酸性橙Ⅱ人工抗原合成的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：（1）称取酸性橙Ⅱ7mg，加入丙酮5ml溶解，再加入丁二酸酐4mg、无水吡啶1mg，60℃加热回流24h；（2）旋蒸除去丙酮，干燥后可见蒸馏烧瓶底部一层橙色，加DMF2ml溶解，再加入NHS2mg、DCC8.3mg，室温下在磁力搅拌器上搅拌24h，获得反应液，将反应液以2000r/min离心10min，去沉淀，制成酸性橙Ⅱ活化中间产物；（3）称取BSA13.3mg或OVA8.6mg，溶于2ml，pH为7.4的PBS中，在磁力搅拌器上边搅拌边将酸性橙Ⅱ活化中间产物逐滴加入到BSA‑PBS或OVA‑PBS溶液中，4℃搅拌过夜；（4）次日将搅拌过夜的反应液置于的透析袋中，4℃冰箱内pH为7.4的PBS中透析72h，每8h换透析液一次；（5）透析结束后，将透析袋内液体离心，去沉淀，即得酸性橙Ⅱ人工抗原。
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