[发明专利]利用双荧光素酶报告基因确定关岭牛MyoDⅠ基因核心启动子的方法有效
| 申请号： | 201310341205.1 | 申请日： | 2013-08-07 |
| 公开（公告）号： | CN103571941A | 公开（公告）日： | 2014-02-12 |
| 发明（设计）人： | 许厚强;李飞;陈伟;陈祥;赵佳福 | 申请（专利权）人： | 贵州大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/66 |
| 代理公司： | 贵阳中新专利商标事务所 52100 | 代理人： | 李亮;程新敏 |
| 地址： | 550025 贵州省贵*** | 国省代码： | 贵州;52 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种利用双荧光素酶报告基因确定关岭牛MyoDⅠ基因核心启动子的方法，包括以下步骤：构建含关岭牛MyoDⅠ基因启动子全长片段和亚克隆片段的重组载体；对骨骼肌生长相关的细胞进行培养和铺板；配制启动子重组子/脂质体的混合物，对步骤2）获得的细胞进行转染；通过双荧光素酶报告基因对步骤3）获得的转染细胞进行双荧光素酶活性检测。本发明具有灵敏度高、检测速度快、费用低、不需使用放射性同位素等优点，使用的pGL3-Basic报告基因，因其无启动子和增强子，可通过荧光素酶报告基因的表达来检测插入启动子的启动活性，并且比较启动子的强弱，进而初步确定核心启动子区域。 | ||
| 搜索关键词： | 利用 荧光 报告 基因 确定 关岭牛 myod 核心 启动子 方法 | ||
【主权项】：
一种利用双荧光素酶报告基因确定关岭牛MyoDⅠ基因核心启动子的方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤1）、构建含关岭牛MyoDⅠ基因启动子全长片段和亚克隆片段的重组载体；步骤2）、对骨骼肌生长相关的细胞进行培养和铺板；步骤3）、配制启动子重组子/脂质体的混合物，对步骤2）获得的细胞进行转染；步骤4）、通过双荧光素酶报告基因对步骤3）获得的转染细胞进行双荧光素酶活性检测。
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