[发明专利]一种提取丝状真菌基因组DNA的方法及试剂盒和遗传转化子的快速筛选方法

摘要

本发明公开了一种提取丝状真菌基因组DNA的方法及试剂盒和遗传转化子的快速筛选方法，该试剂盒包括电动研磨器、溶液A(裂解液)、溶液B（DNA结合液）、溶液C（DNA洗涤液）、溶液D（DNA洗脱液）和DNA吸附柱。该发明的丝状真菌基因组DNA提取方法，耗时短（30min以内），提取的基因组质量高，不会用到有毒的试剂苯酚、氯仿，能很好的满足后续的实验。本发明快速筛选丝状真菌遗传转化子的方法克服了传统转化子筛选方法耗时、耗力、筛选效率低等缺点，特别适合大规模筛选遗传转化子。

主权项

一种丝状真菌DNA提取试剂盒，其特征在于，包括电动研磨器、溶液A、溶液B、溶液C、溶液D和DNA吸附柱；其中，溶液A：10‑50mM Tris‑HCl，10‑50mM EDTA‑2Na，1%‑10%w/v SDS，2‑4M NaCl，0.5%‑2%v/v的β‑巯基乙醇，pH8.0；溶液B：2.5‑6M的盐酸胍或异硫氰酸胍，20%‑50%v/v异丙醇或无水乙醇，5mM‑20mM EDTA‑2Na，pH4.5‑6.5；溶液C：70%‑80%v/v的无水乙醇，pH4.5‑6.5；溶液D：5‑50μg/mL的RNA酶水溶液，用1M NaOH溶液将pH调到≤8.5的碱性。