[发明专利]PcDNA3.1(+)-Fbw7重组质粒及其构建方法与应用有效
申请号: | 201310319435.8 | 申请日: | 2013-07-26 |
公开(公告)号: | CN103352051A | 公开(公告)日: | 2013-10-16 |
发明(设计)人: | 李文岗;谷乐;郭跃 | 申请(专利权)人: | 厦门大学附属成功医院;厦门大学 |
主分类号: | C12N15/85 | 分类号: | C12N15/85;C12N15/66;C12N5/10;A61K48/00;A61P35/00 |
代理公司: | 厦门南强之路专利事务所(普通合伙) 35200 | 代理人: | 马应森 |
地址: | 361000 福*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | PcDNA3.1(+)-Fbw7重组质粒及其构建方法与应用,涉及一种重组质粒。所述构建方法:1)将PSG5-Myc-Fbw7质粒谱图信息与PcDNA3.1(+)质粒谱图信息比较,确定双酶切位点EcoR Ⅰ和NotⅠ;2)双酶切PSG5-Myc-Fbw7质粒;3)双酶切PcDNA3.1(+)质粒载体;4)通过琼脂糖凝胶电泳鉴定双酶切效率,将质粒载体PcDNA3.1(+)和目的基因Fbw7全长进行连接;5)将重组质粒转化感受态细菌,筛选阳性克隆,并进行测序鉴定,抽提PcDNA3.1(+)-Fbw7重组质粒。所述PcDNA3.1(+)-Fbw7重组质粒可用于制备治疗人胆管癌肿瘤药物。 | ||
搜索关键词: | pcdna3 fbw7 重组 质粒 及其 构建 方法 应用 | ||
【主权项】:
PcDNA3.1(+)‑Fbw7重组质粒,其特征在于是通过提取人Fbw7基因全长,以含新霉素筛选标签的PcDNA3.1(+)质粒为载体,在PcDNA3.1(+)的和限制性酶切位点EcoRⅠ和Not Ⅰ之间插入Fbw7基因全长,构建的一种含Fbw7基因全长和新霉素筛选标签的PcDNA3.1(+)‑Fbw7重组质粒。
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