[发明专利]一种检测与补骨脂肝毒性有关的代谢产物的方法及其用途

摘要

本发明提供一种检测与补骨脂肝毒性有关的代谢产物的方法。所述代谢产物为补骨脂素和/或异补骨脂素的二氢二醇代谢产物;所述方法包括补骨脂素和/或异补骨脂素的二氢二醇代谢产物的获取，利用串联质谱，以多反应监测法检测所述代谢产物。本发明还提供所述方法在监测补骨脂素、异补骨脂素、含有补骨脂素和/或异补骨脂素的组合物致肝毒性中的应用，为安全用药和药物毒性的早期预警提供依据。

主权项

一种检测与补骨脂肝毒性有关的代谢产物的方法，其特征在于：所述代谢产物为补骨脂素和/或异补骨脂素的二氢二醇代谢产物;所述方法包括补骨脂素和/或异补骨脂素的二氢二醇代谢产物的获取，利用串联质谱检测所述代谢产物；具体包括如下步骤：1）血浆样品中加入甲醇和乙腈组成的沉淀剂，所述血浆样品和沉淀剂的体积比为1:2‑4，离心，得到上清液；或将补骨脂素和/异补骨脂素，肝微粒体，还原型辅酶II混合，得到反应溶液；在所述反应溶液中，使各物质的浓度满足以下条件：补骨脂素和/或异补骨脂素为20‑50μM，肝微粒体为1‑2mg/ml，补骨脂素和/或异补骨脂素:还原型辅酶II=50:1；37℃孵育60‑120min后加入终止液终止反应，涡旋，离心，得到上清液；2）取步骤1得到的上清液，氮气吹干，甲醇‑水溶液复溶；3）步骤2得到复溶溶液离心，取上清液注射入液相色谱/串联质谱仪，以多反应监测法进行监测，[M+H]⁺母离子峰m/z221，碎片离子峰出现m/z203和m/z175的，即是所述的代谢产物。