[发明专利]一种C3H10T1/2 中胚层多潜能胚胎干细胞株的诱导分化方法有效
申请号: | 201310254446.2 | 申请日: | 2013-06-24 |
公开(公告)号: | CN103361307A | 公开(公告)日: | 2013-10-23 |
发明(设计)人: | 宁光;张晓燕;杨颖 | 申请(专利权)人: | 上海交通大学医学院附属瑞金医院 |
主分类号: | C12N5/077 | 分类号: | C12N5/077;C12N5/0735 |
代理公司: | 上海伯瑞杰知识产权代理有限公司 31227 | 代理人: | 吴瑾瑜 |
地址: | 200025 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明涉及细胞的诱导分化方法,特别涉及一种C3H10T1/2中胚层多潜能胚胎干细胞株的诱导分化方法,其步骤包括:将C3H10T1/2细胞培养于培养液中培养,细胞达80%-90%融合后加入0.25%胰酶5mL消化,细胞收缩呈圆形时终止胰酶消化反应,离心3-5分钟、沉淀、弃去上清,再加入培养液后吹打;按1:4比例传代培养到6孔板或12孔板培养,每2-4天更换培养液1次;待培养板上的细胞长满后置于诱导液A中,2天后撤去诱导液A换成诱导液B,2天后撤去诱导液B换成培养液,每2-4天更换培养液1次即可。本发明诱导分化成的脂肪细胞,可很好地运用到后续的实验中。 | ||
搜索关键词: | 一种 c3h10t1 中胚层 潜能 胚胎 细胞株 诱导 分化 方法 | ||
【主权项】:
一种C3H10T1/2中胚层多潜能胚胎干细胞株的诱导分化方法,其步骤包括:(1)、培养与传代:将C3H10T1/2细胞培养于培养液中,并置于5%CO2的培养箱中培养,待细胞达80%‑90%融合后加入0.25%胰酶5mL消化,细胞收缩呈圆形时加入培养液终止胰酶消化反应,离心3‑5分钟、沉淀、弃去上清,再加入培养液后吹打;按1:4比例传代培养到6孔板或12孔板,置于5%CO2的培养箱中培养,每2‑4天更换培养液1次;(2)、诱导分化:待步骤(1)中的培养板上的细胞长满后置于诱导液A中,2天后撤去诱导液A换成诱导液B,2天后撤去诱导液B换成培养液,每2‑4天更换培养液1次,待90%以上细胞呈圆形并出现大量脂滴,即表示C3H10T1/2细胞已诱导成功。
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