[发明专利]基于桔小实蝇气味结合蛋白的引诱剂筛选方法无效
| 申请号： | 201310152315.3 | 申请日： | 2013-04-27 |
| 公开（公告）号： | CN103245647A | 公开（公告）日： | 2013-08-14 |
| 发明（设计）人： | 李红亮;陈玲;商晗武;王强 | 申请（专利权）人： | 中国计量学院 |
| 主分类号： | G01N21/64 | 分类号： | G01N21/64;C12N15/12;C12N15/70;C07K14/435;C07K1/22 |
| 代理公司： | 杭州浙科专利事务所(普通合伙) 33213 | 代理人： | 吴秉中 |
| 地址： | 310018 浙江省*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 基于桔小实蝇气味结合蛋白的引诱剂筛选方法，属于生物工程技术领域。其包括以下步骤：收集桔小实蝇触角总RNA；通过RT-PCR获得桔小实蝇气味结合蛋白的全长；构建桔小实蝇气味结合蛋白的原核表达载体；通过IPTG诱导桔小实蝇重组气味结合蛋白表达，并通过镍琼脂糖凝胶亲和层析柱对其进行纯化；通过竞争性荧光结合方法获得桔小实蝇重组气味结合蛋白与寄主水果气味挥发物的结合反应谱，解离常数KD低于10μmol/L寄主水果嗅觉以下，荧光竞争的IC50值小于30μmol/L时，确定为适合桔小实蝇的寄主水果嗅觉引诱剂。本发明为桔小实蝇寄主水果嗅觉气味信息引诱剂配方的筛选和设计提供了新的策略。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 桔小实蝇 气味 结合 蛋白 引诱 筛选 方法 | ||
【主权项】：
基于桔小实蝇气味结合蛋白的引诱剂筛选方法，其特征在于包括以下工艺步骤：1）收集桔小实蝇触角总RNA；2）通过RT‑PCR获得桔小实蝇气味结合蛋白的全长；3）构建桔小实蝇气味结合蛋白的原核表达载体；4）通过IPTG诱导桔小实蝇重组气味结合蛋白表达，并通过镍琼脂糖凝胶亲和层析柱对其进行纯化；5）通过竞争性荧光结合方法获得桔小实蝇重组气味结合蛋白与寄主水果气味挥发物的结合反应谱，解离常数KD低于10μmol/L寄主水果嗅觉以下，荧光竞争的IC50值小于30μmol/L时，确定为适合桔小实蝇的寄主水果嗅觉引诱剂。
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