[发明专利]一种SBR中活性污泥样品DNA的提取方法无效
| 申请号： | 201310151351.8 | 申请日： | 2013-04-26 |
| 公开（公告）号： | CN103215254A | 公开（公告）日： | 2013-07-24 |
| 发明（设计）人： | 赵晓祥;张湾;邓航 | 申请（专利权）人： | 东华大学 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 上海泰能知识产权代理事务所 31233 | 代理人： | 黄志达 |
| 地址： | 201620 上海市*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种SBR中活性污泥样品DNA的提取方法,包括：污泥样品前处理、破碎、蛋白质的去除、DNA的分离提纯、基因组DNA纯化、DNA的紫外分光光度分析、DNA琼脂糖凝胶电泳检测。本发明具有快速，高效的特点，可以高效提取印染废水或相同的水质情况废水的活性污泥基因组DNA，具有良好的应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 sbr 活性污泥 样品 dna 提取 方法 | ||
【主权项】：
一种SBR中活性污泥样品DNA的提取方法，包括：（1）活性污泥样样品在处理前首先混匀，采用TENP、PBS溶液和玻璃珠震荡法对样品进行预处理；将经预处理的污泥样品采用冻融法破碎，冷藏、沸水煮，再加入质量百分比浓度2%～10%的SDS缓冲液去除蛋白质；（2）加入0.6倍样品体积的异丙醇，颠倒混匀，进行沉淀；离心，倒掉上清液；自然风干，用TE缓冲液悬浮样品，溶解沉淀，即得基因组DNA粗提液；加入RNase A，35～40℃温浴15‑20min消化RNA，然后采用DNA胶回收试剂盒，按照操作说明进行纯化；（3）用紫外分光光度计测定上述纯化DNA样品在波长230、260、280nm处的吸光光度值；将上述纯化DNA样品进行琼脂糖凝胶电泳，溴化乙锭染色后，用紫外凝胶成像系统拍照。
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